Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

14 novembro 2008, 14:00 • Leonilde Morais Moreira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.

Superprodução de proteínas recombinadas e proteínas de fusão

13 novembro 2008, 14:30 • Leonilde Morais Moreira

Discutiu-se o uso de vectores de expressão controlada com vista à superprodução de proteínas recombinadas em E. coli e presentaram-se as características úteis destes vectores. Foram discutidas proteínas de fusão com uma cauda (por exemplo um pequeno péptido com 6 histidinas ou fusões GST) que permitem a purificação da proteína de fusão num único passo, por cromatografia de afinidade numa coluna com enchimento apropriado à cauda em questão.

Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

12 novembro 2008, 08:00 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.

Tecnologia de microarrays de DNA e a Transcritómica

11 novembro 2008, 15:30 • Leonilde Morais Moreira

Construção e uso de fusões lacZ- analisou-se o modo de construir fusões genéticas entre a região promotora de um determinado gene, cuja expressão genética no seu hospedeiro se pretende estudar, e um gene reporter. Foi exemplificado o uso do gene reporter ser o gene lacZ.

Discutiram-se duas abordagens utilizadas em estudos de expressão genética global, mais concretamente os microarrays de cDNA e os microarrays de elevada densidade (GeneChips). Salientaram-se as vantagens e limitações de cada tipo de plataforma.

Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

11 novembro 2008, 08:30 • Leonilde Morais Moreira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.