Introdução de rDNA em eucariotas

7 outubro 2008, 15:30 • Leonilde Morais Moreira

Descreveram-se os vários métodos de introdução de rDNA: em levedura (transformação, electrotrasnformação); em células animais (métodos físicos como a microinjecção e bombardeamento de partículas e métodos químicos); em células vegetais (transformação por Agrobacterium tumefaciens e métodos físicos).

Apresentaram-se os fundamentos da amplificação de DNA por PCR.

A1-Introdução de plasmídeos em bactérias por conjugação

7 outubro 2008, 08:30 • Leonilde Morais Moreira

Este trabalho laboratorial envolveu a transferência de DNA plasmídico de E. coli para Pseudomonas aeruginosa, utlizando para tal a técnica de conjugação triparental.

A1-Introdução de plasmídeos em bactérias por conjugação

6 outubro 2008, 08:00 • Leonilde Morais Moreira

Este trabalho laboratorial envolveu a transferência de DNA plasmídico de E. coli para Pseudomonas aeruginosa, utlizando para tal a técnica de conjugação triparental.

A1-Introdução de plasmídeos em bactérias por conjugação

3 outubro 2008, 14:00 • Leonilde Morais Moreira

Este trabalho laboratorial envolveu a transferência de DNA plasmídico de E. coli para Pseudomonas aeruginosa, utlizando para tal a técnica de conjugação triparental.

Introdução de rDNA em bactérias

2 outubro 2008, 14:30 • Leonilde Morais Moreira

Discutiu-se as várias alternativas de transformar um fragmento de DNA com extremidades cegas em extremidades coesivas.

Foram apresentadadas 2 técnicas de introdução de rDNA em bactérias: a transformação química e a electrotransformação. Foram discutidos vários parâmetros experimentais que afectam a frequência de transformação/electrotransformação.

Foi apresentada a conjugação triparental. Descrevaram-se as razões e os objectivos da uilização da conjugação triparental para a introdução de plasmídeos mobilizáveis mas não autotransmissíveis por conjugação. Definiu-se plasmídeo mobilizável, plasmídeo ajudante e detalhou-se a técnica experimental a usar na aula de laboratório para introduzir um plasmídeo recombinado construído sobre um vector de clonagem apropriado.