Introdução à análise proteómica

20 novembro 2008, 14:30 • Leonilde Morais Moreira

Iniciou-se a análise proteómica, confrontando-a com a análise transcritómica no que respeita à análise da expressão global de genes, até à proteína madura após eventuais modificações pós-tradução. Descreveu-se a técnica de electroforese a duas dimensões (2D SDS-PAGE) e a identificação de proteínas após digestão com tripsina e separação/identificação por espectrometria de massa.

Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

19 novembro 2008, 08:00 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.

Superprodução de proteínas recombinadas

18 novembro 2008, 15:30 • Leonilde Morais Moreira

Concluiu-se a análise dos vários aspectos envolvidos na tecnologia do rDNA que permitem aumentar em muito a produção de uma qualquer proteína numa bactéria bem como o sua purificação. Deu-se como exemplo da produção de proteínas recombinadas a insulina humana em E. coli e o factor VIII em rato.

Explicou-se a utilização da técnica de Western blot para identificação/quantificação de proteínas.

Apresentou-se a fusão GFP e seu interesse em biologia celular. Deu-se um exemplo de um protocolo baseado na tecnologia do DNA recombinado in vitro que foi usado para localizar o transportador de múltiplas drogas FLR1 na levedura.

Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

18 novembro 2008, 08:30 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.

Hibridação de Southern utilizando sondas não radioactivas - 2ªparte

17 novembro 2008, 08:00 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Pré-hibridação e Hibridação do DNA imobilizado na membrana de nylon com as sondas preparadas na aula anterior. Lavagens restringentes. Detecção dos sinais de hibridação por ligação de um anticorpo para fluoresceína associado ao grupo repórter fosfatase alcalina.