A 3.

3 novembro 2009, 08:00 • Cristina Anjinho Viegas

Conclusão do TP2:

- Visualização de produto de PCR após electroforese da mistura de reacção em gel de agarose;

- Remoção do produto de PCR do gel de agarose por recurso a kit comercial

1ª parte do TP 3:

- Separação electroforética em gel de agarose de fragmentos de restrição do DNA cromossómico de Sphingomonas elodea;

- Desnaturação alcalina dos fragmentos de restrição e transferência para uma membrana de Nylon com carga positiva. 

Mutagénese

29 outubro 2009, 14:30 • Leonilde Morais Moreira

Eliminação de genes por recurso a cassetes de eliminação para a obtenção de mutantes em bactérias e levedura. Discussão de aspectos a ter em atenção para o sucesso do processo.

TP2 - Amplificação do gene pgmG de S. elodea por PCR

28 outubro 2009, 16:00 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Amplificação do gene pgmG de Sphingomonas elodea ATCC31461 por recurso à técnica de PCR. Restrição de DNA genómico de S. elodea com as enzimas HIndIII, BamHI, EcoRI e Pst1, com vista a uma hibridação de Southern a realizar na próxima aula. Análise computacional da sequência de nucleótidos do gene pgmG e da correspodente sequência de aminoácidos.

TP2 - Amplificação do gene pgmG de S. elodea por PCR

28 outubro 2009, 08:00 • Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Amplificação do gene pgmG de Sphingomonas elodea ATCC31461 por recurso à técnica de PCR. Restrição de DNA genómico de S. elodea com as enzimas HIndIII, BamHI, EcoRI e Pst1, com vista a uma hibridação de Southern a realizar na próxima aula. Análise computacional da sequência de nucleótidos do gene pgmG e da correspodente sequência de aminoácidos.

Mutagénese

27 outubro 2009, 15:00 • Leonilde Morais Moreira

Mutagénese aleatória por transposões em bactérias: fundamentos, vantagens e aplicações. Identificação de genes envolvidos em processos biológicos específicos por recurso a plasposões.

Eliminação de genes para a obtenção de mutantes em bactérias. Discussão de aspectos a ter em atenção para o sucesso do processo. Selecção de mutantes resultante de recombinação simples e dupla.