Tipagem Molecular

24 novembro 2009, 15:00 • Leonilde Morais Moreira

Iniciou-se a discussão do conceito " genotipagem" e a seu papel na discriminação de estirpes bacterianas, em particular em estudos epidemiológicos de infecções bacterianas. Discutiram-se a aplicação da electroforese de campo pulsado para separar macrofragmentos de restrição e sua aplicação como um método de genotipagem. Apresentou-se a técnica de ribotipagem clássica e a noção de sonda universal. Apresentaram-se e discutiram-se resultados de ribotipagem bem como a sua utilização no estabelecimento de dendogramas.

Discutiram-se métodos de tipagem molecular, com base na amplificação de DNA por PCR como é o caso da técnica RAPD. Finalizou-se com a descrição da técnica de Multi locus sequence typing (MLST).

A4.

24 novembro 2009, 08:00 • Cristina Anjinho Viegas

Conclusão do TP.3 (Hybridação de Southern com recurso a sondas não radioactivas)

Foi realizado:

1. procedimento de hibridação, com a sonda de DNA marcado com Digoxigenina (DIG) (preparado previamente pela docente);

2. imunodetecção dos hibridos DNA alvo (gene pgmG de S. elodea) - sonda;

3. análise dos sinais de hibridação.

A4.

23 novembro 2009, 08:00 • Cristina Anjinho Viegas

Conclusão do TP.3 (Hybridação de Southern com recurso a sondas não radioactivas)

Foi realizado:

1. procedimento de hibridação, com a sonda de DNA marcado com Digoxigenina (DIG) (preparado previamente pela docente);

2. imunodetecção dos hibridos DNA alvo (gene pgmG de S. elodea) - sonda;

3. análise dos sinais de hibridação.

A4.

20 novembro 2009, 14:00 • Cristina Anjinho Viegas

Conclusão do TP.3 (Hybridação de Southern com recurso a sondas não radioactivas)

Foi realizado:

1. procedimento de hibridação, com a sonda de DNA marcado com Digoxigenina (DIG) (preparado previamente pela docente);

2. imunodetecção dos hibridos DNA alvo (gene pgmG de S. elodea) - sonda;

3. análise dos sinais de hibridação.

Tecnologia de microarrays de DNA e a Transcritómica

19 novembro 2009, 14:30 • Leonilde Morais Moreira

Construção e uso de fusões lacZ- analisou-se o modo de construir fusões genéticas entre a região promotora de um determinado gene, cuja expressão genética no seu hospedeiro se pretende estudar, e um gene reporter. Foi exemplificado o uso do gene reporter ser o gene lacZ.

Discutiram-se duas abordagens utilizadas em estudos de expressão genética global, mais concretamente os microarrays de cDNA e os microarrays de elevada densidade (GeneChips). Salientaram-se as vantagens e limitações de cada tipo de plataforma.