Dissertação
Feasibility of Single Step EDC Coupling for Immobilisation of Xylanase on Biobased Microspheres EVALUATED
A xilanase é uma enzima hidrolítica largamente utilizada em aplicações industriais. Tem surgido um crescente interesse pela imobilização desta enzima uma vez que permite a sua consecutiva reutilização, reduz a contaminação das proteínas pela enzima, torna fácil a separação do producto, entre outras vantagens. Dando continuidade a estudos prévios, este trabalho tem como principal objectivo estudar a praticabilidade de imobilizar xilanase em microesferas feitas de material biológico renovável, mais precisamente esferas de celulose, um polissaccarídeo abundante na natureza, e, por conseguinte, com um impacto ambiental muito reduzido. Inicialmente, foi realizada uma oxidação TEMPO (N-oxil-2,2,6,6-tetrametilpiperidina) com o objectivo de produzir grupos carboxilo (-COOH) na superfície dos esferas de celulose. De seguida, a quantidade dos grupos carboxilo foi medida através de uma titulação conductométrica. Ulteriormente, foi levada a cabo a imobilização da xilanase nos esferas de celulose usando o método single-step EDC (hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida) coupling. Para retirar conclusões, a actividade catalítica da enzima livre foi comparada com a actividade catalítica da enzima imobilizada. Os resultados demonstram que a oxidação foi bem sucedida. A causa mais plausível para este desfecho é o facto de se ter utilizado apenas o reagente EDC, que provocou a reticulação da xilanase, visto que contém grupos carboxilo e grupos amina na sua composição. Esta descoberta confirma que o método single-step EDC coupling não está totalmente optimizado para a xilanase (e, possivelmente para outras enzimas que contenham grupos carboxilo e grupos amina). Assim, futuras investigações devem apurar métodos mais adequados para a imobilização da xilanase.
junho 19, 2017, 14:30
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