Dissertação

Stirred cell purification of monoclonal antibodies by ultrafiltration with polyethyleneimine-modified polyethersulfone membrane EVALUATED

O desenvolvimento de novas tecnologias para a purificação de anticorpos monoclonais (mAbs) é motivado por limitações da produção e estão direcionados para a resolução de problemas correntes e futuros. Em muitas plataformas de purificação de mAbs, a cromatografia é o processo principal utilizado na etapa de “polishing” de modo a remover níveis reduzidos de impurezas associadas ao processo e assegurar depuração viral. Embora sejam capazes de assegurar os requisitos de purificação, são processos caros. Neste contexto, várias tecnologias membranares estão a ser desenvolvidas para a purificação de mAbs, de maneira a diminuir os passos cromatográficos sem a perda de pureza no produto final. Um destes processos é a separação com membranas, baseadas em interações por afinidade. Neste trabalho, membranas de polietersulfona comercialmente disponíveis foram modificadas por sulfonação com ácido sulfúrico, seguido de deposição de polietilenimina e reticulação com “butanedioldiglycidylether”, de modo a criar uma membrana positivamente carregada. A membrana foi caracterizada e estudos de “fouling” com diferentes soluções proteicas foram realizados, de modo a estudar adsorção de solutos. As membranas exibem seletividade com o pH, força iónica e a natureza da proteína, mas o desempenho é profundamente afetado pela adsorção proteica e pela conformação do polímero. Os melhores resultados foram obtidos para pH 9 com 56% de retenção de anticorpo e uma pureza de 70% no permeado, para as membranas modificadas.
Adsorção proteica, Anticorpos monoclonais, Carga positiva, Membranas, Modificação da superfície

Julho 12, 2016, 14:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Marília Clemente Velez Mateus

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Colaborador Não Remunerado Docente