Dissertação
Stirred cell purification of monoclonal antibodies by ultrafiltration with polyethyleneimine-modified polyethersulfone membrane EVALUATED
O desenvolvimento de novas tecnologias para a purificação de anticorpos monoclonais (mAbs) é motivado por limitações da produção e estão direcionados para a resolução de problemas correntes e futuros. Em muitas plataformas de purificação de mAbs, a cromatografia é o processo principal utilizado na etapa de “polishing” de modo a remover níveis reduzidos de impurezas associadas ao processo e assegurar depuração viral. Embora sejam capazes de assegurar os requisitos de purificação, são processos caros. Neste contexto, várias tecnologias membranares estão a ser desenvolvidas para a purificação de mAbs, de maneira a diminuir os passos cromatográficos sem a perda de pureza no produto final. Um destes processos é a separação com membranas, baseadas em interações por afinidade. Neste trabalho, membranas de polietersulfona comercialmente disponíveis foram modificadas por sulfonação com ácido sulfúrico, seguido de deposição de polietilenimina e reticulação com “butanedioldiglycidylether”, de modo a criar uma membrana positivamente carregada. A membrana foi caracterizada e estudos de “fouling” com diferentes soluções proteicas foram realizados, de modo a estudar adsorção de solutos. As membranas exibem seletividade com o pH, força iónica e a natureza da proteína, mas o desempenho é profundamente afetado pela adsorção proteica e pela conformação do polímero. Os melhores resultados foram obtidos para pH 9 com 56% de retenção de anticorpo e uma pureza de 70% no permeado, para as membranas modificadas.
julho 12, 2016, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Colaborador Não Remunerado Docente