Dissertação

Validação do método de contagem de viáveis totais num anti-infecioso não estéril EVALUATED

O presente trabalho teve como objetivo desenvolver e validar um método analítico de deteção de viáveis totais num anti-infecioso não estéril da família das tetraciclinas. Este método será utilizado nos laboratórios de microbiologia analítica da CIPAN para pesquisa de contaminações do produto em questão. Para isso, o procedimento escolhido terá de ser capaz de neutralizar a ação antimicrobiana do anti-infecioso, sem comprometer a integridade das células microbianas. A validação do método é a verificação experimental da capacidade de crescimento dos microrganismos na presença do produto não estéril. Por este motivo, na análise é adicionada uma suspensão de um microrganismo de referência indicado pela farmacopeia ao meio, sendo o crescimento celular posteriormente comparado com um controlo. Foram realizados diferentes testes de eficácia da neutralização do produto, usando o método de filtração em membrana de celulose, variando a composição do meio de cultura, o volume e número de lavagens e a divisão da amostra pelas membranas. Nestes testes usaram-se as espécies Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus, sendo o seu crescimento indicativo de uma neutralização eficaz. O método em vigor na CIPAN no início deste trabalho já estava validado para Aspergillus brasiliensis e Candida albicans e, por esse motivo, estes microrganismos de referência não foram utilizados. Destes testes resultou um procedimento que foi submetido a uma validação em triplicado de forma a demonstrar a robustez do mesmo. O método analítico criado ficou validado para quatro dos microrganismos de referência, podendo considerar-se um método capaz de detetar diferentes contaminações microbiológicas.
Contagem de viáveis totais, Produtos não estéreis, Microrganismos de referência, Método de filtração, Membrana de celulose, Anti-infecioso

Novembro 23, 2016, 9:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Ana Cristina Anjinho Madeira Viegas

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

João Ernesto Carvalho Leite

CIPAN

Especialista