Dissertação

On the Intracellular pH of Candida glabrata - Decision for disease EVALUATED

Candida glabrata é o agente mais comum causador de candidíases a seguir a Candida albicans, apesar de filogeneticamente mais próximo de Saccharomyces cerevisiae. O pH intracelular (pHi) afecta todos os processos bioquímicos celulares. A homeostase/adaptação deste é importante para a sobrevivência de patogéneos em diferentes condições ambientais e foi relacionado com mecanismos de virulência em Candida. Determinar a dinâmica da alteração do pHi em células vivas sob diferentes condições é fundamental para compreender a resposta ao stress e a adaptação e papel do pHi na patogenecidade. Neste estudo, pHluorin raciométrica, proteína derivada de GFP sensível ao pH, foi expressa no citosol de C. glabrata para avaliação do pHi. O perfil de pHi a diferentes pH externos (pHext), incluindo os de locais de infecção (pH 5.0, 4.0 característico da vagina e 7.4 do sangue) foi determinado durante o crescimento a 30 e 37ºC, bem como sob stress por ácidos-fracos. Observou-se uma melhor adaptação das células a 37ºC. Durante a fase exponencial de crescimento em glucose, o pHi decresceu gradualmente, apresentando valores semelhantes a diferentes pHext. Tal dever-se-á provavelmente a acidificação metabólica. Em carência de glucose e sob stress por ácido-fraco, a significativa acidificação registada coincidiu com paragem do crescimento. Apesar de a pH 7.4 a variação de pHi não ter sido igualmente acentuada, decresceu abaixo do pHext. Isto sugere que variações no pHi assumem relevância quando a concentração de glucose é baixa. Os efeitos de ácidos-fracos em C. glabrata foram semelhantes aos previamente obtidos em S. cerevisiae, ambos apresentados neste estudo.
Candida glabrata, levedura, pH intracelular, pHluorin, virulência

Dezembro 9, 2011, 15:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Gertien Smits

UNIVERSITEIT VAN AMSTERDAM

Doutor

ORIENTADOR

Isabel Maria De Sá Correia Leite de Almeida

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedratico