Dissertação

Characterization of Chromatography Steps in the Downstream Process of a Monoclenal Antibody EVALUATED

As cromatografias representam uma grande limitação no processo de purificação (DSP) de um anticorpo monoclonal (mAb). No DSP do Anticorpo A existem quatro cromatografias, pelo que há a necessidade constante da sua optimização. O parâmetro físico Capacidade Dinâmica de Ligaçao (DBC) permite determinar a quantidade máxima de anticorpo que uma resina consegue adsorver, sob condições especificas do processo. Foi estudada a DBC de duas resinas do DSP do Anticorpo A ? Resina S, usada na cromatografia de Adsorpção em Leito Expandido (EBA) e Resina P, usada na cromatografia de afinididade em Proteina A. Devido a considerações práticas, os estudos deveriam ser efectuados em modelos de scale-down qualificados, representativos da escala de produção, o que implicou a definição de um modelo de scale-down para a cromatografia EBA. Este foi qualificado para o rendimento de produto e para o cromatograma em UV280nm. Contudo, relativamente ao volume relativo de eluiçao e à concentração de Proteínas da Célula Hospedeira (HCP?s) e de DNA, verificou-se uma diferença significativa entre as duas escalas. Foi impossível determinar a DBC da Resina S com o método usado, devido à baixa cocentração de anticorpo e elevada concentração de matéria adsorvente na soluçao de harvest. A DBC determinada para a Resina P foi 20.4±0.9 mg/mL e 19.8±1.7 mg/mL, para 8.5 e 9.3-9.5 minutos de tempo de residência, respectivamente. Estes valores são semelhantes à capacidade estatica da resina, devido aos elevados tempos de residência usados. Nesta gama de tempos de residência, o empacotamento da resina nao afecta a DBC.
Anticorpo A, Purificação, Capacidade Dinâmica de Ligação, Adsorpção em Leito Expandido, Resinas, Cromatografia, Boas Práticas de Produção, Scale-down, Escala de Produção, Altura Equivalente de um Prato Teórico

Outubro 29, 2010, 9:30

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Chakib Borsali

Novartis, Huningue

ORIENTADOR

Maria Raquel Murias dos Santos Aires Barros

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Associado