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Dissertação

Monitoring the reaction of corticoids with lysine by mass spectrometry: towards the development of analytical methodologies for the differential diagnosis of Arterial Hypertension EVALUATED

Detalhes: Mundialmente, a hipertensão arterial (HTN) afeta mais de mil milhões de pessoas e as complicações associadas são responsáveis por 9.4 milhões de mortes anuais. Consequentemente, desenvolver uma metodologia para o seu diagnóstico diferencial é crucial. Um dos principais fatores associados à HTN resistente e doença renal crónica (CKD) é a aldosterona. No entanto, os atuais métodos clínicos focados em determinar os níveis plasmáticos e urinários de aldosterona livre não são efetivos como técnicas de diagnóstico preditivo ou diferencial. Com o objetivo final desenvolver biomarcadores de HTN resistente e de CKD melhores do que os níveis livres de aldosterona, este trabalho explorou várias abordagens baseadas na técnica de espectrometria de massa para investigar se: i) a aldosterona tem a capacidade de modificar covalentemente proteínas, produzindo adutos covalentes estáveis; e se ii) estes adutos podem ser enriquecidos utilizando materiais contendo grupos funcionais hidrazida. A modificação in vitro da albumina do soro humana (HSA) com aldosterona, seguida de digestão em aminoácidos e análise LC-HRMS, permitiu identificar resíduos de lisina modificados. Estes adutos são consistentes com a formação de adutos de Heyns formados por estabilização da base de Schiff. Resultados semelhantes foram obtidos com outros esteróides como a prednisolona, dexametasona, cortisol e corticosterona, sugerindo que esta é uma capacidade geral de corticosteróides contendo o grupo funcional aciloína. Uma metodologia de enriquecimento deste adutos baseada no uso de resinas de hidrazida foi testada. Muito embora careça de otimizações, os resultados obtidos sugerem que poderá ser muito útil para a deteção destes adutos em amostras biológicas.
Keywords: Hipertensão, Corticóides, Adutos Covalentes de Proteínas, Espetrometria de Massa, Biomarcadores

Discussão: dezembro 3, 2021, 14:30