Dissertação

Discovery and characterization of phosphorylases with desired industrial properties EVALUATED

α-1,4 e β-1,4-glucano fosforilases podem ser utilizadas como biocatalisadores em diversas aplicações industriais sendo que o principal objetivo deste estudo foi a caracterização funcional de enzimas destes dois tipos. Das α-1,4-glucano fosforilases de trabalho, A84 revelou um grande potencial na síntese de glucose-1-fosfato, uma das suas possíveis aplicações biotecnológicas. A84 é um biocatalisador claramente termoestável, retém 50% da sua atividade enzimática a temperaturas entre 35-65 ºC e na gama de pH 6-8. Além disto apresenta grande afinidade com o substrato utilizado (KM = 0.06 ± 0.01 mM), mistura de maltodextrinas e elevada eficiência catalítica (kcat = 85.9 ± 2.9 s-1), tal como desejado. Relativamente às enzimas do tipo β-1,4-glucano fosforilases, fosforilases de celodextrinas (CDP), foi também concretizado o objetivo, e foram caracterizadas enzimas com potencial industrial, como é o caso da CDP_7, altamente termoestável, que a temperaturas entre 35-65ºC e pH entre 7-8.5 consegue assegurar 50% da sua atividade enzimática revelando ainda afinidade com ambos os substratos testados: 4.0 ± 1.1 mM e KM.G1P = 1.3 ± 1.2 mM e eficiências catalíticas competitivas: kcat .cellobiose= 57 ± 4 s-1 e kcat .G1P= 16 ± 4 s-1. Foi também descoberta uma CDP com atividade de fosforilase de celobiose, o que reflete uma característica pouco comum apenas documentada uma vez.
Biocatálise, α-1-4-Glucano fosforilase, β-1-4-Glucano fosforilase, Caracterização funcional, Aplicações industriais.

Outubro 24, 2018, 11:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

ORIENTADOR

Pedro Carlos De Barros Fernandes

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Prof Auxiliar Convidado

ORIENTADOR

Tom Desmet

Ghent University

Professor