Dissertação
Advances in Duchenne Muscular Dystrophy gene therapy: Test of BSA nanoparticles for nucleic acid delivery EVALUATED
A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença recessiva associada ao cromossoma X causada principalmente por mutações no gene que codifica a distrofina. O skipping de exões antisense-mediated consegue recuperar o quadro de leitura do gene distrofina permitindo assim a síntese de distrofina funcional. O uso de AONs para media terapia humana ainda apresentam inúmeras barreiras que necessitam de ser ultrapassadas: algumas relacionadas com a eliminação/acumulação no organismo, entrega-alvo, e a baixa capacidade de atravessar a membrana plasmática. As nanopartículas tem sido exploradas como veículos de entrega de várias entidades terapêuticas. Neste projecto, testamos uma nova química de AONs modificados para tratar um modelo de ratinhos DMD através de terapia de modelação do splicing para induzir o skipping do exão 51. Colocamos a hipótese que moléculas terapêuticas de DNA terão um uptake melhorado nos tecidos-alvo se os ácidos nucleicos terapêuticos foram encapsulados em nanopartículas antes de serem administrados. Um plasmídeo repórter, pEGFP-NLS foi encapsulado em nanocapsulas de BSA para posterior injecção num modelo animal. O objectivo deste projecto consiste em avaliar a eficiência da entrega do gene após administração sistémica das nanopartículas num modelo animal. O nível de expressão da proteína EGFP-NLS foi avaliado no pulmão e no fígado dos animais através de de análises de imunohistoquímica e citometria de fluxo. São necessários estudos futuros de forma a melhorar o desenvolvimento de nanopartículas desta classe como veículos de entrega controlada de ácidos nucleicos.
dezembro 2, 2015, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar
ORIENTADOR
Célia da Conceição Vicente Carvalho
Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa
Especialista