Sumários
Regulação da expressão genética (aula de compensação)
21 dezembro 2016, 14:00 • Arsénio do Carmo Sales Mendes Fialho
Em procariotas:
Aspectos básicos da regulação da expressão génica ao nível da transcrição, tradução e pós-tradução. Regulação da transcrição em procariotas: regulação por indução do substrato e regulação por repressão pelo produto final.
O operão da lactose (lac) de E. coli: organização, função e mecanismos moleculares subjacentes à regulação da sua transcrição; genes estruturais do operão lac (lac Z, lac Y, lac A) e gene regulador (lac I); o substrato lactose como indutor; regulação negativa via lacI/operador e a regulação positiva via CAP/AMPciclíco/promotor. Repressão catabólica pela glucose; crescimento diáuxico.
O operão do aminoácido triptofano (trp) de E. coli: organização, função e mecanismos moleculares subjacentes à regulação da sua transcrição; genes estruturais do operão trp (trp E-A) e gene regulador (trp R – apo-repressor); repressão pelo produto final (o triptofano como co-repressor). Mecanismos moleculares da regulação da transcrição por atenuação.
Em eucariotas:
Os factores de transcrição: activadores e repressores; características estruturais (domínios funcionais de ligação ao DNA) e suas funções. Regulação da transcrição por metilação de ilhas CpG presentes nas regiões promotoras. Promotores alternativos.
Condensação e descondensação da cromatina e níveis de expressão genética; modificação de histonas (acetilação e desacetilação) por acção enzimática.
TP6
16 dezembro 2016, 08:00 • Cristina Anjinho Viegas
Digestão com uma endonuclease de restrição do DNA cromossómico e
plasmídeos extraídos no TP5 (iniciado pela docente no dia anterior). Na
aula, os alunos realizaram a separação e visualização dos
respectivos fragmentos de restrição (e de amostras de DNA não digerido)
por electroforese em gel de agarose. Análise dos resultados com os
alunos.
Tradução
15 dezembro 2016, 11:30 • Arsénio do Carmo Sales Mendes Fialho
O código genético e suas características. As etapas do processo de tradução: iniciação, alongamento e terminação da tradução. Formação do complexo de iniciação: reconhecimento da sub-unidade do ribossoma por regiões consenso presentes a 5’ no mRNA procariótico (região de Shine-Delgarno) e eucariótico (5´cap). O codão de iniciação em procariotas e eucariotas. Composição do ribossoma (locais A, P e E); ligação dos tRNA activados e estabelecimento da ligação peptídica; o codão de terminação. Noção de polissoma.
TP6
15 dezembro 2016, 08:00 • Cristina Anjinho Viegas
Digestão com uma endonuclease de restrição do DNA cromossómico e
plasmídeos extraídos no TP5 (iniciado pela docente no dia anterior). Na
aula, os alunos realizaram a separação e visualização dos
respectivos fragmentos de restrição (e de amostras de DNA não digerido)
por electroforese em gel de agarose. Análise dos resultados com os
alunos.
Transcrição
13 dezembro 2016, 11:30 • Arsénio do Carmo Sales Mendes Fialho
O gene como unidade funcional do genoma: a região promotora e a região de terminação de um gene procariota. O produto da transcrição: o RNA mensageiro (mRNA), de transferência (tRNA) e ribossomal (rRNA); suas características. Os pequenos RNAs.
A transcrição de genes do cromossoma de Escherichia coli usado como modelo procariota: as etapas da transcrição: iniciação, alongamento e terminação. A enzima RNA polimerase e seu modo de acção; o factor sigma e a formação do complexo de iniciação; a síntese do RNA no sentido 5´para 3’. Mecanismos de terminação da transcrição dependentes e independentes do factor Rho.
O promotor dos genes de organismos eucariotas; RNA polimerases.
Transcrição de RNAs ribossomais: o seu processamento; organização e composição dos ribossomas procarióticos e eucarióticos.
Transcrição de RNAs de transferência: o seu processamento e a activação dos RNAs de transferência; as enzimas aminoacil-tRNA sintetases.
Transcrição de RNAs mensageiros: o transcrito de mRNA: a região codificante e regiões UTR a 5’ e a 3’. A degradação do mRNA como mecanismo de controlo da expressão génica pós-transcricional.
Diferenças entre os transcritos de mRNA de procariotas e eucariotas. Estruturas mono e policistrónicas; noção de operão.
O processamento do mRNA eucariótico: alteração do terminal 5’ (capping), presença de intrões/exões, o processo de splicing e alteração do terminal 3’ (poli-adenilação). O processo de splicing alternativo e suas consequências.