{pt=Functional analysis of uncharacterized candida glabrata drug: H+ antiporters} {} EVALUATED

Detalhes: {pt=Candida glabrata é uma levedura patogénica que emergiu na última década como a segunda maior causa mundial de infecções fúngicas. Este fenómeno, juntamente com a emergência generalizada do fenómeno de resistência a múltiplas drogas, é um obstáculo para o sucesso dos antifúngicos, provocando um aumento dos custos e duração dos cuidados de saúde. A acção de transportadores de múltiplas drogas tem sido descrita como uma causa comum de resistência a múltiplas drogas em leveduras patogénicas. Neste trabalho foi estudado o papel de dois potenciais transportadores MFS-MDR da levedura C. glabrata, CgAqr1 e CgTpo2/3 quanto ao seu papel na resistência a três classes de antifúngicos - azóis, polienos e fluoro-pirimidinas. As células de C. glabrata desprovidas do gene CgAQR1 mostraram uma maior susceptibilidade do que a estirpe selvagem ao clotrimazol, miconazol, tioconazol, anfotericina B e flucitosina. A ausência do gene CgTPO2/3, por sua vez, provocou um aumento da susceptibilidade das células de C. glabrata ao clotrimazol, miconazol, tioconazol e cetoconazol, mas um aumento da resistência à flucitosina. Os resultados dos ensaios de transporte com 3H-clotrimazol suportam a hipótese de que o CgTpo2/3 catalisa o transporte de clotrimazol para o exterior da célula, enquanto o papel do CgAqr1 parece ser indirecto. Uma possível correlação, foi encontrada, entre os níveis de transcrição do gene CgAQR1 e a resistência à flucitosina, num pequeno grupo de isolados clínicos. Os resultados obtidos no âmbito deste trabalho revelam o claro envolvimento dos genes CgAQR1 e CgTPO2/3 na resistência a múltiplas drogas em C. glabrata., en=Candida glabrata is a pathogenic fungi that emerged in the last decade as a common cause of mucosal and invasive fungal infections, being the second most common cause of candidiasis worldwide. The widespread emergence of resistance to multiple antifungal drugs, poses a threat to the success of antifungal therapy, increasing costs of care and duration of hospitalization. The action of Multidrug Resistance transporters, belonging to the ABC and MFS, has been frequently described as a common cause of MDR. In present study the role of the putative C. glabrata MFS-MDR transporters, CgAqr1 and CgTpo2/3, in the resistance to three classes of antifungal drugs - azoles, polyenes and fluorinated pyrimidines - was characterized. C. glabrata cells devoid of the CgAQR1 gene shown to exhibit a higher susceptibility than the parental strain to clotrimazole, miconazole, tioconazole, amphotericin B an flucytosine. The delection of CgTPO2/3 was found to increase C. glabrata susceptibility to clotrimazole, miconazole, tioconazole and ketoconazole, but to increase its resistance to flucytosine. 3H-clotrimazole transport assays provide evidence to support the notion that CgTpo2/3 catalyses clotrimazole export out of the yeast cell, while the role of CgAqr1 in clotrimazole seems to be indirect. Finally, a possible correlation between CgAQR1 transcript levels and flucytosine resistance in a small set of clinical isolates was observed. Results obtained demonstrate the involvement of CgAQR1 and CgTPO2/3 in multidrug resistance. This study demonstrates for the first time the determinant role of C. glabrata genes CgAQR1 and CgTPO2/3 in the acquisition of resistance to antifungal drugs.}

Discussão: dezembro 6, 2011, 11:0

Orientação

AUTOR

Joana de Jesus David Nunes (ist158497)

ORIENTADOR

Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar