Dissertação
Miniaturized Platforms for High Throughput Biocatalysis EVALUATED
A capacidade de realizar reações específicas tem atraído um grande interesse para os enzimas, especialmente para tirar partido de tais características e aplicá-las em bioprocessos (industriais). Novas tendências têm surgido nos últimos anos, nomeadamente em relação ao uso de dispositivos miniaturizados. Dois métodos de imobilização foram usados em paralelo ao longo deste trabalho: ligação covalente em Amberlite IRC-86 e aprisionamento em PVA, sendo o último o que mostrou melhores eficiências de imobilização (94%) e desempenho geral. A temperatura e pH ótimos para o enzima imobilizado em Amberlite IRC-86 foi de 55ºC e pH 4 enquanto para o PVA foi de 65ºC e pH 4,5. Não se observaram quaisquer desvios de temperatura relativamente à forma livre, apenas aumentos na tolerância ao calor aquando a imobilização em ambos os suportes. Com Amberlite IRC-86 observou-se um desvio no pH de 5 para 4 aquando imobilização. A reação com o enzima aprisionado mostrou sinais de precisar de agitação ao volume reacional de 1 mL, enquanto para o enzima ligado covalentemente tal ocorreu aos 3 mL. A cinética dos sistemas agitados e não agitados foi comparada para investigar o impacto do volume reacional e da presença/ausência de agitação no desempenho da reação, sendo os resultados dependentes do método de imobilização. Uma abordagem à escala reduzida com microplacas foi usada para avaliar a influência de parâmetros geométricos e dinâmicos na reação com o objetivo de otimizar as condições operacionais e estabelecer as microplacas como plataformas de alta produção, fiáveis e eficientes para a produção de frutose.
novembro 4, 2016, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Pedro Carlos De Barros Fernandes
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Prof Auxiliar Convidado