Dissertação
Comparative study of the toxicity of synthetic nanoparticles to yeast Saccharomyces cerevisiae EVALUATED
O aumento da produção de nanopartículas de óxido de cobre (CuO-NPs) e suas múltiplas aplicações levanta questões sobre os potenciais riscos destas. No entanto, o conhecimento sobre os seus efeitos continua a faltar. Assim sendo, é crucial o desenvolvimento de modelos e métodos de avaliação eficientes. O principal objetivo desta tese foi avaliar a toxicidade de CuO-NPs usando levedura Saccharomyces cerevisiae como modelo. Tanto a estirpe Saccharomyces cerevisiae BY4741 (tipo selvagem) como a estipe mutante de eliminação simples BY4741_Δcup2 (cup2Δ) foram expostas a CuO-NPs, tendo como referência células expostas a CuSO4). A curva de crescimento e a análise de unidades formadoras de colónias (CFU) mostrou que ambas as estirpes apresentam susceptibilidade a CuO-NPs, sendo a estirpe selvagem mais vulnerável a CuO-NPs do que a CuSO4. A capacidade das CuO-NPs induzir oxidação de proteínas foi confirmada através da determinação dos grupos tiol da proteína livres. Técnicas de microscopia nuclear permitiram obter imagens da distribuição de Cu e a sua quantificação, em células individualizadas. Verifica-se que ambas as estirpes apresentam maior concentração de Cu quando expostas a CuO-NPs relativamente a CuSO4. A análise do perfil de Cu em profundidade, em células de S. cerevisiae selvagem e mutante utilizando a técnica de RBS (Rutherford Backscattering Spectrometry) permitiu concluir que o Cu derivado de CuO-NPs se acumula no interior das células. Este trabalho preliminar destacou o potencial de S. cerevisiae como modelo para o estudo da toxicidade de nanopartículas e a adequação das metodologias desenvolvidas para avaliação da bioacumulação de CuO-NPs.
dezembro 9, 2015, 11:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Isabel Maria De Sá Correia Leite de Almeida
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático
