Dissertação
Understanding particle formation pathways: protein aggregation and protein-excipient interactions undergoing interfacial stress EVALUATED
A temperatura, o stress mecânico e as interações interfaciais, como exemplo impurezas, são fatores de risco importantes, em biológicos, que conduzem a problemas como a formação de partículas, incluindo agregados, que podem comprometer a segurança dos doentes. Esta tese investiga como duas proteínas terapêuticas (A e B) com treze formulações cada, reagem a condições de stress. Procurando compreender a formação de novas partículas e mecanismos de agregação consequentes do stress provocado. As formulações são compostas soluções de apenas proteína, proteína e cada surfactante, a combinação de proteína com surfactante e impurezas associadas ao surfactante, e proteína com óleo de silicone. As 26 formulações foram submetidas a estudos de estabilidade ao stress térmico, a testes de stress mecânico e a oito ciclos de congelação-descongelação para analisar a concentração de partículas com MFI, FlowCAM e HVM e o raio com DLS. Além disso, as formulações de Proteína A foram submetidas a estudos acelerados envolvendo stress térmico e stress térmico combinado com stress mecânico, com análise em tempo real do desenvolvimento do peso molecular, seguido da análise da concentração e do raio das partículas. Obtiveram-se resultados consistentes, indicando que as duas proteínas têm sensibilidades diferentes às condições, as condições sob este tipo de proteínas (5ºC) mostraram efetivamente manter as suas propriedades, diferentes condições desbloqueiam diferentes mecanismos de agregação, os surfactantes estabilizam eficazmente as proteínas sob várias condições de stress quando comparados com a sua ausência, exceto o polisorbato 20 para o stress térmico, algumas das impurezas adicionadas mostraram ter um efeito desestabilizador.
dezembro 14, 2023, 11:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
ORIENTADOR
Miguel Ângelo Joaquim Rodrigues
Departamento de Engenharia Química (DEQ)
Professor Auxiliar