Dissertação
A non-invasive tool for monitoring live macrophage activation in the immune response EVALUATED
A espectrometria de Ressonância Magnética Nuclear (NMR) tem sido utilizada em diversos estudos, sendo que os mais recentes têm-se focado na sua aplicação em metabolómica. Na presente tese, procurou-se estender tais aplicações à análise metabólica de células vivas, em particular, macrófagos. Foram caracterizadas extensivamente os padrões metabólicos seguidos por macrófagos em diferentes estados de ativação – inativo (M0), pró-inflamatório (M1) e anti-inflamatório (M2). No contexto deste trabalho, apresenta-se o desenvolvimento de um método de identificação para distinguir células ativadas M1, bem como a análise estatística realizada para suportar os resultados. É expectável que esta aplicação tenha um grande impacto nos métodos atuais de caracterização de macrófagos, que dependem grandemente de fixação e immunostaining. Trabalhos adicionais poderiam transformar NMR numa ferramenta diagnóstica para muitas condições patológicas envolvendo macrófagos. Também foi testada uma aplicação de NMR como mecanismo de quality control para vesículas extracelulares (EVs) a fins terapêuticos. Utilizando EVs secretadas por diferentes linhas celulares e genótipos, foram recolhidos espectros que fornecem informações sobre a composição da sua carga, bem como estrutura da sua membrana. A deteção de picos "anómais" possibilita a deteção de impurezas e a avaliação da variabilidade de lote para lote de EVs produzidas. A partir da análise estatística realizada, foi possível inferir que as modificações genéticas em estudo têm impacto sobre as EVs produzidas. Dada a disponibilidade limitada de amostras, os resultados obtidos são preliminares, mas o desenvolvimento de protocolos padronizados poderá contribuir para tornar NMR numa ferramenta de controlo de qualidade para este tipo de agente terapêutico.
setembro 27, 2023, 16:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
ORIENTADOR
Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Associate Professor