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Dissertação

Engineering Kidney Organoids Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells under 3-Dimensional Conditions EVALUATED

Detalhes: As células estaminais pluripotentes induzidas humanas (iPSCs) são uma ferramenta útil para a investigação: têm o potencial de diferenciação em cada uma das três camadas germinais, que por sua vez podem servir como base para gerar organoides. Na última década, houve progresso no desenvolvimento de protocolos de geração de organoides de rim, uma vez que os modelos renais in vitro facilitam a modelação de doenças, triagem de fármacos e potencialmente permitir a regeneração de órgãos. Este estudo intende investigar a fase inicial da diferenciação renal e a influencia do meio de cultura, configuração espacial e o efeito de várias pequenas moléculas na população celular final. Os protocolos de Morizane, Takasato e Uchimura foram totalmente adaptados para condições 3D. Este projeto propõe o desenvolvimento de um novo protocolo híbrido “Morisato”, inspirado no conceito da indução separada de populações progenitoras de rim e posterior co-cultura, de forma a permitir a formação de estruturas complexas. Por último, foi avaliada a utilidade dos organoides renais resultantes como modelo de dano por drogas. Organoides de rim obtidos mostraram ser heterogéneos em forma e tamanho, mas demonstraram capacidade de auto-organização em estruturas tubulares impressionantes, incluindo túbulo proximal, túbulo distal e também glomérulos. Contudo, os organoides revelaram-se imaturos, com resposta a drogas inconclusiva e sem formar ductos coletores. Conclui-se que os organoides de rim podem ser gerados a partir de iPSCs em condições totalmente 3D e revelar que o desenvolvimento de diferentes populações renais é um processo altamente dinâmico, possível de ser controlado por fatores externos.
Keywords: Células estaminais pluripotentes induzidas, Organoides de rim, Diferenciação renal, Cultura 3D, Cultura 2D

Discussão: novembro 22, 2022, 15:0