Dissertação
Paper-based Bioassays for Dengue Diagnostics Using Gold Nanoparticle Colorimetric Probes EVALUATED
O acesso a testes rápidos e portáteis para diagnosticar Dengue, uma doença viral que afecta 40% da população mundial, pode representar um importante recurso para países em desenvolvimento, onde a doença é frequentemente endémica. Este tipo de testes, denominados de “point-of-care”, requerem pequenos volumes de amostra (nano-microlitros), concentrações baixas de analitos (femtomolar - milimolar), não exigem uma preparação elaborada das amostras e geram resultados em intervalos de tempo muito curtos (≤1h). A criação destes dispositivos em papel (PADs) tira partido das propriedades das nanopartículas de ouro (AuNPs) sendo possível obter um sinal colorimétrico com resposta qualitativa visível a olho-nu, eliminando leitores externos e técnicos experientes. Neste trabalho, foram desenvolvidos dispositivos em papel, para a detecção da hibridação de sondas de DNA com RNA alvo (DENV2), dependente da captura pelo complexo CBM64-ZZ:anti-biotina, que se encontra fixado ao papel, e da presença das AuNPs. Foram desenvolvidos dois sistemas de hibridação DNA:RNA: i) sistema A inclui duas cadeias de ácidos nucleicos em que uma corresponde ao RNA viral (DENV2) marcado com biotina, e a segunda cadeia é de DNA acoplada às AuNPs ii) sistema B inclui três cadeias de ácidos nucleicos: duas cadeias de DNA, uma acoplada a AuNPs e a segunda marcada com biotina e uma cadeia de RNA alvo não marcado. A presença de AuNPs revela um sinal encarnado quando ocorre hibridação e ausência de sinal quando não ocorre hibridação, o que foi verificado nos testes com os dois sistemas.
julho 26, 2016, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Duarte Miguel De França Teixeira dos Prazeres
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático