Dissertação
Azurin interferes with lipid raft organization by decreasing the membrane protein caveolin – 1 EVALUATED
A azurina, proteína anticancerígena produzida por Pseudomonas aeruginosa, entra nas células cancerígenas humanas por uma via endocítica mediada pelas caveolae, co-localizada com a caveolina-1. A azurina causa um aumento da expressão de genes associados à formação de endossomas, organização membranar e ao transporte e localização de lípidos membranares. As caveolae estão envolvidas em mecanismos celulares desregulados nas células tumorais, e elevados níveis de caveolina-1 levam à formação de metástases. O trabalho desta dissertação coloca a hipótese de que, recorrendo a endocitose através das caveolae, a azurina pode deslocalizar as jangadas lipídicas e remover os receptores membranares, reduzindo a sinalização que promove a progressão do cancro. Dois modelos de cancro foram tratados com azurina, as linhas celulares de cancro da mama SUM-149 e de cancro de pulmão A549. O efeito semelhante na adesão observado tanto com o tratamento das células com metil-β-ciclodextrina como com azurina sugere que o tratamento com azurina leva a uma internalização das jangadas lipídicas, confirmado através da marcação com CTxB (sub-unidade B da toxina da cólera). Os níveis de caveolina-1 nas células quando tratadas com azurina foi estudado, mostrando um aumento inicial. Porém, após 24h de exposição, os níveis de proteína total de caveolina-1 estão diminuídos. Finalmente verifica-se, por imunofluorescência, que após 24h de tratamento com azurina, a azurina e a caveolina-1 ainda estão co-localizadas e é possível observar, por imunoprecipitação, que estas proteínas se ligam. A diminuição dos níveis de caveolina-1 pode contribuir para uma diminuição do comportamento tumoral.
outubro 21, 2014, 16:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Arsénio do Carmo Sales Mendes Fialho
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Associado