Dissertação
The role of the flanking polyQ regions of huntingtin exon 1 on lipid binding: Insights into Huntington´s disease EVALUATED
A doença de Huntington (HD) é uma desordem neurodegenerativa grave, autossómica dominante e progressiva. A HD é causada por uma expansão de poliglutaminas (poliQ) no primeiro exão da proteína huntingtina (HTT). O fragmento HTT do exão 1 (Httex1) com uma expansão de poliQ é altamente tóxico e forma agregados/corpos de inclusão em células neurais, replicando grande parte da patologia da HD. As membranas biológicas desempenham um papel crítico na agregação e toxicidade do Httex1. Neste trabalho, a interação do Httex1-23Q com vesículas unilamelares grandes (LUVs) de diferentes composições lipídicas (com lípidos zwitteriónicos, misturas de “rafts” lipídicas e lípidos aniónicos) foi analisada por fluorescência do Acrylodan e Atto 488. Cada região adjacente ao domínio poliQ – N-terminal Nt17 e C-terminal região rica em prolinas (PPR) – foi marcada de forma específica com fluoróforos reativos a tiol. Os resultados com Acrylodan mostram que o Httex1 se liga de forma similar a vesículas lipídicas zwitteriónicas e misturas de “rafts” lipídicas (componente hidrofóbico). Além disso, o segmento N-terminal Nt17 interage com as membranas lipídicas e o C-terminal PRR permanece exposto ao solvente no estado ligado à membrana. Finalmente, os decaimentos de anisotropia de fluorescência do Atto 488 ligado ao Nt17 ou ao PRR também revelam que estes domínios experimentam dinâmicas diferentes após a ligação à membrana. O PRR é altamente flexível (semelhante a uma proteína intrinsecamente desordenada) e o Nt17 adota um estado menos flexível ao ligar-se a membranas lipídicas aniónicas.
junho 29, 2023, 9:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Associado
ORIENTADOR
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar Convidado