Dissertação
Separation of Bacteriophage Tails To Develop Novel Recognition Elements EVALUATED
Com o crescimento da população mundial, o uso de antibióticos tornou-se um tratamento médico indispensável para a prevenção de infeções bacterianas. No entanto, o uso constante, amplo e por vezes imprudente de antibióticos resultou em bactérias resistência aos mesmos, o que representa uma preocupação para a saúde global. A falta de diagnóstico precoce e identificação do agente patogénico fortalece a causa para essa resistência. Os biossensores permitem um diagnóstico médico rápido, fiável e fácil de usar com o auxilio de elementos de reconhecimento. Neste contexto, os bacteriófagos representam promissores elementos de reconhecimento para identificação de bactérias resistentes a antibióticos devido às suas características excecionais. Atualmente, biossensores baseados em fagos não são eficientes dado que os fagos infetam e induzem a lise da bactéria hospedeira no seu estado natural. Assim, esta Dissertação de Mestrado teve como objetivo principal melhorar e desenvolver bacteriófagos como elementos de reconhecimento avançados para uma rápida e fiável identificação do agente patogénico através da separação das cabeças dos bacteriófagos das suas caudas, eliminando assim a capacidade de infeção, mas mantendo a capacidade de reconhecimento. O processo em geral consistiu na produção de bacteriófagos T4 específicos para E. coli por infeção de culturas bacterianas, preparação e amplificação de um stock de fago T4 e laboração de métodos mecânicos (sonicação em banho maria e sonicação com sonda) e não mecânicos (choque osmótico) de disrupção para a separação de caudas de fago. A ultrasonicação com sonda a 25 W demonstrou ser o método mais promissor para atingir o objetivo proposto.
janeiro 21, 2021, 9:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar