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Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF

23 outubro 2024, 08:00 Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF por imunodetecção de resíduos de fosfotirosinas, com anticorpo específico para estes resíduos. Esta imunodetecção foi feita sobre uma membrana contendo fracções de duas formas da proteína purificada BceF: uma forma selvagem, que retem a actividade, e uma forma mutada no local de ligação a ATP, que é incapaz de funcionar como cinase.

Aula leccionada pelo estudante de doutoramento Diogo Couceiro.


Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF

22 outubro 2024, 08:00 Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF por imunodetecção de resíduos de fosfotirosinas, com anticorpo específico para estes resíduos. Esta imunodetecção foi feita sobre uma membrana contendo fracções de duas formas da proteína purificada BceF: uma forma selvagem, que retem a actividade, e uma forma mutada no local de ligação a ATP, que é incapaz de funcionar como cinase.

Aula leccionada pelo estudante de doutoramento Diogo Couceiro.


Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF

21 outubro 2024, 08:00 Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Avaliação da actividade autocinase da proteína BceF por imunodetecção de resíduos de fosfotirosinas, com anticorpo específico para estes resíduos. Esta imunodetecção foi feita sobre uma membrana contendo fracções de duas formas da proteína purificada BceF: uma forma selvagem, que retem a actividade, e uma forma mutada no local de ligação a ATP, que é incapaz de funcionar como cinase.

Aula leccionada pelo estudante de doutoramento Diogo Couceiro.


SDS-PAGE seguido de western blot

16 outubro 2024, 08:00 Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Tendo-se selecionado as amostras mais enriquecidas com a proteína BceF, purificada na aula anterior, procedeu-se a uma electroforese das referidas amostras em gel de poliacrilamida.

Foram obtidos dois geis, um utilizado para vizualização da proteína total após coloração com azul de comassie e o outro utilizado para o processo de transferência para uma membrana de nitrocelulose (western blot).
Aula leccionada pelo estudante de doutoramento Diogo Couceiro.


SDS-PAGE seguido de western blot

15 outubro 2024, 08:00 Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Tendo-se selecionado as amostras mais enriquecidas com a proteína BceF, purificada na aula anterior, procedeu-se a uma electroforese das referidas amostras em gel de poliacrilamida.

Foram obtidos dois geis, um utilizado para vizualização da proteína total após coloração com azul de comassie e o outro utilizado para o processo de transferência para uma membrana de nitrocelulose (western blot).
Aula leccionada pelo estudante de doutoramento Diogo Couceiro.