Dissertação
{en_GB=Isolation and Characterization of Different Cell Types from Lipoaspirates Used for Treating Alopecia} {} EVALUATED
{pt=A alopecia é uma patologia capilar frequente e a injeção de gordura no escalpe tem sido estudada como possível terapia. Porém, a retenção a longo prazo dos enxertos de gordura é variável, podendo ser baixa. Recentemente, o enriquecimento dos enxertos com a fração vascular estromal (FVE) tem sido estudado para aumentar a viabilidade das células e a sobrevivência dos enxertos. A otimização dos procedimentos de recolha, processamento e injeção da gordura é essencial para apurar esta terapia, sendo para tal necessário analisar parâmetros como a técnica cirúrgica e a largura das cânulas utilizadas. Neste trabalho foram estudadas nove condições abrangendo variações nestes parâmetros para avaliar a sua influência nas células da FVE. Foram usadas cânulas estreitas por serem necessárias para terapias ambulatórias. A gordura recolhida foi processada através de um protocolo enzimático. O número de células variou consideravelmente com o dador, mas em média diminuiu com maior manipulação da gordura e utilização de cânulas mais finas. Tais condições mostraram também uma associação com acentuado rompimento de adipócitos e consequente libertação de lípidos, tal como verificado através de citometria. Adicionalmente, foi observada uma diminuição na população de células estaminais mesenquimais (CEM) presente na FVE. Não obstante, algumas condições exibiram progenitores estromais com capacidade clonogénica. A identidade das CEM obtidas após cultura da FVE foi confirmada relativamente ao imunofenótipo, clonogenicidade e potencial para diferenciação. Mais estudos deverão ser realizados para encontrar um compromisso entre cânulas mais largas e procedimentos minimamente invasivos para o tratamento da alopecia., en=Alopecia is a frequent hair loss disorder and the injection of fat into the scalp has been investigated as a possible therapy. However, the retention of transplanted fat is quite variable, sometimes presenting low survival rates. Recent studies have focused on the enrichment of fat grafts with stromal vascular fraction (SVF) to increase cell viability and graft retention. The optimization of the fat harvest, processing and injection procedures is essential for the improvement of this therapy. Therefore, it is necessary to analyse parameters such as the surgical technique and the width of the cannulas used. In this work, nine conditions involving variations on these parameters were studied in order to assess their influence on SVF cells. Small cannula widths were focused on as they are necessary for ambulatory therapies. The harvested fat was processed by an enzymatic isolation protocol. Cell yield presented high donor dependence, but average results revealed a decrease with increasing fat manipulation and narrower cannulas. Such conditions were also associated with increased adipocyte rupture and consequent release of oil droplets as shown through flow cytometry. Additionally, a decrease on the mesenchymal stem cell (MSC) population present in the SVF was verified. Nonetheless, some conditions exhibited stromal progenitors with clonogenic capacity. The identity of the isolated MSCs obtained upon culture of SVF was confirmed in terms of immunophenotype, clonogenicity and differentiation potential. Further studies should be performed to find a compromise between wider cannulas and minimally-invasive procedures for the treatment of alopecia.}
novembro 20, 2018, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Ana Margarida Pires Fernandes Platzgummer
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Colaborador Docente
