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Dissertação

{en_GB=The anticancer effects induced by the bacterial protein azurin: evaluation of cytotoxicity, membrane destabilization and cell death in multiple cancer cell models} {} EVALUATED

Detalhes: {pt=A azurina é uma proteína excretada pela bactéria Pseudomonas aeruginosa que tem vindo a ser estudada como um agente anticancerígeno. Este trabalho exploratório visa contribuir para a elucidação da extensão da inibição da proliferação celular, disrupção da membrana, e morte celular em múltiplas linhas celulares cancerígenas (HeLa, adenocarcinoma da cérvix; AGS, adenocarcinoma do estômago; e U2OS, osteossarcoma), após tratamento com azurina. Foram realizados ensaios de MTT para determinar a proliferação celular, e citometria de fluxo IP-FL3 para medir a disrupção da membrana e a morte celular (células não fixas e fixas, respetivamente). Após tratamento (100µM de azurina a 72h) todas as linhas cancerígenas testadas apresentaram inibição dose-resposta na proliferação independentemente do p53 status. A azurina contribuiu para a desestabilização da membrana celular para estas exposições de longa duração com 16.4±6.4% (HeLa), 45.9±5.0% (AGS), 19.9±10.6% (U2OS) e 10.3%1 (BHK, linha celular não tumoral de fibroblasto) das populações permeáveis a iodeto de propídio (IP). Esta desestabilização foi superior à morte celular, onde HeLa, AGS e U2OS apresentaram 6.9±3.2%, 14.9±4.6% e 6.8±3.9% da população hipoploide após tratamento com azurina a 100µM durante 72h, comparativamente aos 4.6±0.8% observados para BHK. Neste trabalho observou-se um efeito antiproliferativo (citostático) induzido pela azurina nas linhas celulares testadas, com disrupção da membrana ao nível populacional. Embora presente, a azurina aparenta ter, por si só, efeitos citotóxicos limitados parecendo mais razoável o seu uso como coadjuvante, visando melhorar a eficácia de outros fármacos anticancerígenos e possivelmente mitigar eventos de indução de multirresistência, em vez da sua utilização individual., en=Azurin is a protein secreted by the bacterium Pseudomonas aeruginosa which has been studied as an anticancer agent. This exploratory work aims to contribute to the elucidation of the extent of cell proliferation inhibition, membrane disruption and cell death in multiple cancer cell lines (HeLa, cervix adenocarcinoma; AGS, gastric adenocarcinoma; and U2OS, osteosarcoma) upon treatment with azurin. In order to ascertain cell proliferation MTT assays were performed. To measure membrane disruption and cell death PI-FL3 flow cytometry was employed (with non-fixed and fixed cells, respectively). After exposure to treatment (100 µM azurin at 72 h), all cancer cell lines showed a dose dependent proliferation inhibition regardless of p53 status. Azurin contributed to the destabilization of the cell membrane upon these long exposures with 16.4±6.4% (HeLa), 45.9±5.0% (AGS), 19.9±10.6% (U2OS) and 10.3% (BHK, non-tumorigenic fibroblast cell line) propidium iodide (PI) permeable populations. This destabilisation was superior relative to the observed cell death, with HeLa, AGS, U2OS cells presenting 6.9±3.2%, 14.9±4.6%, 6.8±3.9% hypoploid populations, respectively, against the 4.6±0.8% hypoploid population in BHK cells. Thus, in this work, azurin presented an anti-proliferative (cytostatic) effect in the tested cell lines with apparent membrane disruption in the population. Although present, azurin appears to have limited cytotoxic effects by itself, thus seeming more reasonable to be used as a co-adjuvant, in order to enhance the efficacy of other anti-cancer drugs and possibly to surpass multidrug resistance events, rather than as a standalone therapeutic.}
Keywords: {pt=Azurina, terapias anticancerígenas, morte celular, desestabilização membranar, en=Azurin, anti-cancer therapies, cell death, membrane destabilization}

Discussão: setembro 23, 2021, 9:0