FenixEdu™

Dissertação

{en_GB=Role of Tauroursodeoxycholic Acid during Expansion and Neural Commitment of Human Induced Pluripotent Stem Cells under chemically-defined conditions} {} EVALUATED

Detalhes: {pt=A descoberta de células estaminais pluripotentes induzidas humanas (hiPSCs) revolucionou a investigação no campo das células estaminais. Por exemplo, o comprometimento neural de hiPSCs pode contribuír para encontrar novas soluções para doenças neurodegenerativas. No entanto, são necessários sistemas de cultura celular eficientes para expandir e diferenciar hiPSCs com rendimentos elevados. Experiências prévias quanto ao ácido tauroursodesoxicólico (TUDCA), um ácido biliar endógeno, como agente anti-apoptótico, proliferativo e modulador da diferenciação de células estaminais neurais (NSC), motivou o estudo do seu efeito na expansão e comprometimento neural de hiPSCs em progenitores neurais (NP). Neste trabalho, foram adicionadas diferentes concentrações de TUDCA a meios de cultura definidos de hiPSCs. Embora a substância não tenha influenciado a expressão de marcadores de pluripotência e viabilidade cellular, observou-se um significativo aumento da proliferação para as concentrações entre 5 e 10 micromolares, quando comparada com os controlos. Foi implementado um protocolo de comprometimento neural de hiPSCs com adição de TUDCA, para a formação de NPs Pax6+/Nestin+ no prazo de 12 dias e o posterior aparecimento de rosetas neurais. A quantificação de rosetas mostrou um aumento de 56% e 99% para as concentrações de 5 e 10 micromolares, respectivamente, quando comparando com o controlo. Este trabalho foi a primeira tentativa de testar a influência do TUDCA na proliferação e diferenciação de hiPSCs. Os resultados demonstraram a influência positiva que o TUDCA teve em ambos os processos e, no futuro, espera-se que estes desenvolvimentos possam ser transferidos para sistemas de cultura em larga escala., en=The discovery of human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) has revolutionized the research in the stem cell field. For instance, the commitment of hiPSCs into the neuronal lineage brings great promise in finding new solutions for neurodegenerative diseases. Nevertheless, efficient culture systems have to emerge in order to expand and differentiate hiPSCs with high yields. Previous reports on the role of an endogenous bile acid, tauroursodeoxycholic acid (TUDCA) as an anti-apoptotic, proliferative and differentiation-modulating agent in neural stem cell (NSC) cultures have motivated the study of the effect of this bile acid in both hiPSC expansion and neural commitment into neural progenitor (NP) cells. In this work, different concentrations of TUDCA were added to a biochemically-defined hiPSC culture media. Although the bile acid did not appear to influence cell viability and pluripotency, it significantly induced higher fold increases in the number of cells for concentrations ranging 5 to 10 micromolars, when compared to controls. A hiPSC neural commitment protocol with addition of TUDCA was implemented, with successful generation of Pax6+/Nestin+ NPs within 12 days and posterior generation of rosette-like structures. Notably, quantification of rosettes showed an increase of 56% and 99% in cultures treated with 5 and 10 micromolars of TUDCA, respectively, when compared to controls. Here, we demonstrated for the first time the influence of TUDCA in the proliferation and differentiation of hiPSCs, revealing that this bile acid had a positive influence in both processes. Importantly, in the future, these findings could be translated to large-scale culture systems.}
Keywords: {pt=Células estaminais pluripotentes induzidas, Ácido tauroursodesoxicólico, Expansão, Comprometimento neural, en=Human induced pluripotent stem cells, Tauroursodeoxycholic acid, Expansion, Neural commitment}

Discussão: dezembro 4, 2015, 10:0