{en=A Combined Approach to Study Centromeric Chromatin Organization and Dynamics: Engineering a Cell Cycle Visualization Tool to Study Chromatin Dynamics} {en=Engineering a Cell Cycle Visualization Tool to Study Chromatin Dynamics} EVALUATED

Detalhes: {pt=Nas células eucariotas, o DNA encontra-se compactado numa estrutura complexa de natureza muito dinâmica, a cromatina. Para manter a informação contida na cromatina durante vários eventos disruptivos como a replicação do DNA, a reparação ou a transcrição, é crucial que exista uma regulação cuidadosa da deposição dos seus componentes. A organização da cromatina tem por unidade básica o nucleossoma, que pode enrolar-se em estruturas de ordem superior, como domínios de cromatina. Os centrómeros, que são domínios onde a cromatina está muito compacta, são definidos epigeneticamente, e a sua correcta propagação é essencial para garantir a segregação dos cromossomas durante a divisão celular. Apesar de muitos dos processos celulares ocorrerem constitutivamente, alguns estão restritos a períodos específicos. Algumas alterações na cromatina são observadas durante pequenas janelas temporais, e os mecanismos responsáveis por estes eventos podem estar fortemente relacionados com o ciclo celular e a sua regulação. Foi desenvolvida uma ferramenta para visualizar o ciclo celular, Fucci, que permite distinguir as células na fase G1 de outras que estejam nas fases S, G2 ou Mitose. Esta ferramenta pode ser utilizada para estudar o comportamento dinâmico da cromatina durante o ciclo celular em células vivas. Através da utilização de marcadores fluorescentes, é possível visualizar directamente a fase do ciclo celular para cada célula. Existe um elevado número de aplicações, desde imagens em tempo real, separação de células ou alterações do perfil do ciclo celular, podendo estender-se a utilização desta ferramenta para outros temas e campos da biologia., en=In eukaryotic cells, DNA is packaged in a complex structure with a highly dynamic nature, chromatin. In order to maintain the information carried by chromatin through several disruptive events such as replication, DNA repair or transcription, a tight regulation in the assembly of its core components is crucial. Chromatin is organized in basic nucleosome units, which are then folded in higher order structures, such as chromatin domains. At centromeres, compact chromatin domains are epigenetically defined, and their faithful propagation is essential for proper chromosome segregation during cell division. Although many processes occurring within the cell are constitutive, some are restricted to specific timings. Some changes in chromatin are observed in short time windows of the cell cycle, and the mechanisms responsible for these events may be closely linked to the cell cycle and its regulation. Here, we exploit a cell cycle visualization tool, Fucci, enabling to distinguish cells in G1 from those in S, G2 or Mitosis. The tool can be used to study the dynamic behaviour of chromatin throughout the cell cycle in living cells. Using fluorescent probes, this tool allows direct visualization of the cell cycle phases in individual cells. From live cell imaging, cell sorting and changes in the cell cycle profiles, the wide range of applications can be extended further, beyond other topics and fields within biology.}

Discussão: setembro 3, 2009, 11:0

Orientação

AUTOR

Jorge Miguel Valente Beira (ist155770)

CO-ORIENTADOR

Leonor Parreira

Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Gabriel António Amaro Monteiro

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar