Dissertação

{en_GB=Changes in N-acetyltransferase 8 in kidney tubular cell - injury, recovery and mesenchymal stem/stromal cell treatment } {} EVALUATED

{pt=A doença renal é um grave problema de saúde global, frequentemente consequência de lesões agudas (hemorragia, septicémia, toxicidade) mas também lesões prolongadas, que pode culminar em fibrose. Em resposta à lesão, as células tubulares renais (CTR) poderão desdiferenciar, proliferar e re-epitelizar. Contudo, de momento, a resposta clínica é ineficiente não existindo fármacos capazes de reverter a progressão da doença renal. A N-acetiltransferase-8 (NAT8) é uma enzima particularmente expressa no rim e descrita como renoprotetora, motivando a presente investigação à sua expressão na desdiferenciação/re-epitelização. O potencial terapêutico das células estaminais mesenquimais (CEMs) no tratamento da doença renal foi escolhido como ferramenta para averiguar, numa abordagem in vitro, a relevância da NAT8 no processo de regeneração das CTRs. Foi analisado o potencial terapêutico do meio condicionado (MC) de CEMs e a possível ligação à expressão de NAT8. CTRs foram expostas a transforming growth factor-β1 (TGF-β1, estímulo lesivo) promovendo desdiferenciação e suspensão de TGF-β1 induziu re-epitelização. Os resultados sugerem uma redução da expressão de NAT8 em resposta a lesão prolongada. Durante a re-epitelização, inicialmente foi verificada uma redução na NAT8 recuperada no final do ensaio. Quando administrado após remoção do TGF-β1, o MC-CEM promoveu a re-epitelização de modo aparentemente independente da NAT8. Contudo, sob lesão continua, o efeito protetor de MC-CEM coincidiu com marcada recuperação da expressão de NAT8. Tanto quanto foi possível apurar esta foi a primeira observação do efeito parácrino das CEMs na expressão de NAT8, em CTR, e da possível importância desta para a manutenção da capacidade regenerativa na desdiferenciação. , en=Kidney disease is a worldwide health concern and a common consequence of acute insults (as hemorrhage, sepsis, drug toxicity) with unpredictable prognosis and lacking therapeutic options. Prolonged injury promotes progression to fibrosis and currently, there are no drugs to reverse kidney disease progression. However, renal tubular epithelial cells (TECs) might dedifferentiate, proliferate and re-epithelize upon injury. N-acetyltransferase-8 (NAT8) is an enzyme highly expressed in the kidney and suggested to be renoprotective. This work assessed the expression of NAT8 throughout dedifferentiation and re-epithelization. As mesenchymal stem/stromal cells (MSCs)-based therapies have had positive outcomes, herein these were used as a tool to investigate NAT8’s relevance for tubular repair. Hence, in an in vitro experimental setup the therapeutic potential of MSCs conditioned media (CM) and a possible link to NAT8 was investigated. TECs were exposed to transforming growth factor-β1 (TGF-β1, injury stimulus) promoting dedifferentiation and TGF-β1 withdrawal-induced re-epithelization. Results showed that prolonged injury was associated with a decrease in NAT8. The re-epithelization was biphasic with a decrease of NAT8 followed by a late rescue. When MSC-CM was used in the absence of a harmful stimulus it promoted re-epithelization, which was not related to an increase in NAT8 transcription. Contrastingly, MSC-CM addition under continued TGF-β1 exposure was associated with marked recovery of NAT8 transcription. To the best of our knowledge, this is the first report of the paracrine effects of human MSCs on NAT8 in the kidney and of the relevance of NAT8 to maintain regenerative potential when TECs undergo dedifferentiation. }
{pt=Células mesenquimais estaminais (CEM), lesão renal, N-acetil-transferase tipo 8 (NAT8), túbulo renal proximal, en=Mesenchymal stem/stromal cell (MSC), N-acetyltransferase 8 (NAT8), Renal injury, Renal tubular epithelial cell}

Novembro 17, 2017, 11:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Sofia de Azeredo Gaspar Pereira

CEDOC-NMS Chronic Diseases Research Center - NOVA Medical School

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar