FenixEdu™

Dissertação

{en_GB=Serum-free and Feeder-free Expansion of a patient-specific Fanconi Anemia Human Induced Pluripotent Stem Cell (hiPSC) line corrected by gene editing} {} EVALUATED

Detalhes: {pt=As células estaminais pluripotentes induzidas humanas (hiPSC) apresentam a vantagem de poderem ser obtidas a partir de células somáticas de qualquer indivíduo. Quando obtidas a partir de um individuo afetado por uma doença genética, as iPSCs podem ser usadas para recapitular os efeitos dessa mesma doença permitindo a sua modelação bem como a pesquisa de novos fármacos. As células obtidas desta forma podem também ser usadas para terapia celular após a devida correção genética. Neste estudo, foram usadas como modelo células hiPSC geneticamente corrigidas obtidas a partir de um doente com Anemia de Fanconi, graças a uma colaboração com a Divisão de Terapias Hematopoiéticas Inovadoras em Madrid, Espanha. Esta doença genética é definida por uma marcada predisposição para o cancro e eventualmente falência da medula óssea. Foi possível definir um protocolo que permitiu a expansão desta linha celular num meio de cultura quimicamente definido (mTeSR1) e usando Matrigel como substrato de adesão. Foi possível expandir as células até cerca de seis vezes o seu valor inicial durante oito dias de cultura. Após expansão, as células mostraram uma expressão normal dos marcadores de superfície (Tra-1-60, Tra-1-81, SSEA-4) bem como dos factores de transcrição (Nanog, Sox-2, Oct-4). Para além disso as células mostram expressão normal de marcadores de células neurais (Pax6 e Nestin) após serem submetidas a um protocolo de diferenciação em linhagem neural. Foi possível demonstrar que a expansão da linha celular modelo é possível e, recorrendo ao uso de materiais de grau GMP, poderão então ser usadas para aplicações clínicas., en= Since the emergence of the Induced Pluripotent Stem Cell (iPSC) technology that one of their strengths is their source: iPSCs can be obtained from the reprogramming of the somatic cells of any individual. In fact, when obtained from an individual suffering from a genetic disease, iPSCs can be used to recapitulate the effects of that disease at a cellular level, allowing to perform disease modelling and drug screening. Cells obtained that way could be used for cell therapy of genetic disorders upon the correct genetic editing. In this study, we used a hiPSC model obtained from a patient with Fanconi Anemia, a genetic disorder that is defined by a predisposition for cancer and eventually bone marrow failure, after genetic correction in order to restore their proper function, thanks to a collaboration with the Division of Hematopoietic Innovative Therapies in Madrid, Spain. It was possible to find a protocol that allowed the expansion of these cells in a chemically defined medium (mTeSR1) and using the Matrigel substrate. They were expand up to six times their original number after eight days of culture. After expansion, they showed the expression of pluripotency surface markers (Tra-1-60, Tra-1-81, SSEA-4) as well as transcription factors (Nanog, Sox-2, Oct-4).They were also capable of expressing several neural markers (Pax6 and Nestin) after being differentiated into the neural lineage. These results demonstrate that the expansion of these cells is possible and, by using GMP grade materials, they could eventually be used for clinical applications. }
Keywords: {pt=Células estaminais induzidas, Anemia de Fanconi, expansão celular, terapia celular, modelação de doenças, en=Induced pluripotent stem cells, Fanconi anemia, cell expansion, cell therapy, disease modelling}

Discussão: dezembro 2, 2015, 10:0