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Dissertação

Protocol optimization for the ultrastructural preservation of cilia in Drosophila melanogaster's antenna EVALUATED

Detalhes: Cílios são organelos constituídos por microtúbulos e são necessários para várias funções da célula como mover-se, detectar estímulos e organizar a arquitectura celular. Alterações nestes organelos podem levar ao surgimento de um conjunto de doenças humanas chamadas ciliopatias e ao desenvolvimento de cancro. Para compreender estas patologias é necessário um conhecimento detalhado da biologia dos cílios que se encontram conservados ao longo da evolução em organismos eucariontes, como a Drosophila melanogaster (Dm). A Dm é utilizada no estudo destes organelos pois é um modelo organismo vantajoso para o estudo de várias propriedades biológicas e fisiológicas. Estas encontram-se conservadas entre a mosca e os mamíferos e cerca de 75% dos genes humanos causadores de doenças têm homologia na mosca. Este modelo também dispõe de ferramentas de engenharia genética, baixo custo comparativo, rápido ciclo de vida e ausência de problemas éticos. Contudo, existe ainda uma falha na aplicação de microscopia electrónica de transmissão (MET) no estudo da ultra-estrutura da Dm. Uma das razões é exosqueleto rígido de quitina que envolve a mosca, em particular a antena, um órgão que contém neurónios ciliados. Ao mesmo tempo, os protocolos de preparação de amostras biológicas não evoluíram muito desde a década de 60 e ainda não foram utilizadas novas técnicas de crio-processamento para o estudo deste órgão. Consequentemente, este projecto tem como objectivo obter um protocolo optimizado para MET tanto para o processamento químico como para o crio-processamento da antena da Dm, o que poderá ampliar a utilização deste modelo em investigação.
Keywords: Ultra-estrutura, optimização de protocolo, cílios, Drosophila melanogaster, fixação química, criofixação.

Discussão: novembro 12, 2015, 14:0