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Dissertação

Toxicidade dos metais em Saccharomyces cerevisiae: Yap5 e a homeostase do ferro Yap5 e a homeostase do ferro EVALUATED

Detalhes: Neste trabalho foi estudada a relevância dos factores de transcrição da família Yap de S. cerevisiae na destoxificação de alguns metais. Verificámos que (i) Yap1 poderá ser essencial para o crescimento em excesso de mercúrio, (ii) em excesso de cádmio, além do Yap1 outros factores poderão estar envolvidos, (iii) Yap1, Yap3 e Yap7 poderão ser importantes na destoxificação do excesso de cobalto, (iv) Yap5 está envolvido no stress por excesso de ferro e (v) YAP5 não é induzido ao longo do tempo de exposição ao ferro e o seu potencial de transactivação é activado na presença deste metal. De forma a identificar alvos do Yap5, utilizámos microarrays de DNA. Os genes CCC1 (transportador vacuolar de ferro), GRX4 (oxidorredutase), COB (citocromo b) e YBL053w (ORF dúbia) foram identificados. Por Northern blot, constatámos que CCC1 e GRX4 são totalmente dependentes deste factor. A diferença observada a nível dos fenótipos das estirpes ccc1 e yap5 na presença de ferro sugere que o mutante yap5 poderá apresentar níveis suficientes de Ccc1 para transportar o ferro para o interior do vacúolo. Como GRX4 é muito expresso em condições de stress provocado pelo ferro, colocámos a hipótese da célula desencadear modificações no seu estado redox por serem gerados radicais superóxido. Sendo Aft1 um factor de transcrição cuja localização celular é regulada via Grx4/Grx3, poderá acontecer que numa estirpe yap5 Aft1 não esteja a ser eficazmente removido do núcleo, levando à transcrição de genes importantes para o uptake do ferro aumentando a concentração intracelular deste metal.
Keywords: Saccharomyces cerevisiae, resposta ao stress, Yap, metais, Yap5, ferro

Discussão: outubro 16, 2009, 17:0

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