Contribution to the Understanding of Enzyme Activity on Immobilised Substrates: Kinetic Studies of Lipases and Esterases’ Solid-Phase Catalytic Activity on Controlled Pore Glass & The Influence of Oligo-Glycine Linker Chain Attached to Substrate on the a-Chymotrypsin’s Activity in Solution Kinetic Studies of Lipases and Esterases’ Solid-Phase Catalytic Activity on Controlled Pore Glass & The Influence of Oligo-Glycine Linker Chain Attached to Substrate on the a-Chymotrypsin’s Activity in Solution EVALUATED

Detalhes: Esta Tese de Mestrado na área de Biocatálise do Estado Sólido teve como objectivo a realização de estudos cinéticos da actividade de Lipases e Esterases em superfícies hidroxilada e esterificada de vidro com porosidade regulada (CPG). É descrito o processo de derivatização dos suportes que deu origem às superfície de CPG contendo grupos Hexanol (CPG-OH) com 5 e 22 µmoles/g de grupos OH imobilisados por grama de CPG (dimensão de poro de 3000 e 1400 Å, respectivamente). Este material foi subsequentemente derivatizado por esterificação com ácido decanóico, tendo resultado nos suportes CPG-Éster de 3000 Å e 1400 Å com 0,4 e 1,6 µmol/g, na ordem apresentada. É apresentado um breve estudo espectroscópico dos suportes usando técnica de MAS 1H NMR. Os testes enzimáticos revelaram actividade catalítica somente em CPG-OH por parte das Lipases de Mucor miehei, Candida antarctica e Aspergillus niger, apresentando reduzidos rendimentos. Foram apenas realizados estudos cinéticos às Lipases Mucor miehei e C. Antarctica mas nenhum produziu resultados passíveis de caracterização cinética. Num projecto paralelo, os péptidos Hidrocloreto de GlicilGlicina Metil Éster, Hidrocloreto de GlicilGlicilGlicina Metil Éster e N-Acetil-L-Triptofano-GlicilGlicina foram sintetisados e caracterizados espectrocospicamente por 1H e 13C RMN.

Discussão: maio 27, 2008, 9:30

Orientação

AUTOR

Rui Filipe de Oliveira Dias (ist150054)

CO-ORIENTADOR

Peter Halling

Univ. Strathclyde

Especialista

ORIENTADOR

Maria Raquel Murias dos Santos Aires Barros

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Associado