Dissertação
Setting up the LC-MS/MS approach for plasma proteomics in the DM4You Project CONFIRMED
Uma forma eficaz de avaliar o impacto nutracêutico da dieta na saúde é através da análise de biomarcadores, como as proteínas plasmáticas, amplamente utilizadas como indicadores de várias doenças. No entanto, muitos biomarcadores humanos permanecem não caracterizados, e a gama dinâmica de abundância de proteínas no plasma é pouco compreendida. Este estudo teve como objetivo testar procedimentos a serem utilizados no âmbito do projeto DM4You para minimizar alterações pós-colheita. A inclusão de inibidores de fosfatases e proteases, juntamente com a padronização do tempo entre a extração e a centrifugação, demonstrou uma preservação de um terço na concentração proteica, conforme evidenciado pelos métodos de quantificação de Bradford e Kalb e Bernlohr. Em relação ao potencial redutor das amostras, foram utilizados dois protocolos (Folin-Ciocalteu e ensaio TEAC), tendo sido alcançada otimização apesar dos diferentes resultados obtidos em cada ensaio. Para a análise proteómica, foram testados três protocolos de preparação para demonstrar o impacto da fracionamento e enriquecimento. A relação custo-tempo deve ser considerada em estudos futuros, especialmente com 80 participantes e múltiplas coletas de amostras. Este trabalho fornece dados para a seleção de um protocolo experimental para investigações futuras.
novembro 20, 2024, 17:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
ORIENTADOR
Carla Maria Alexandre Pinheiro
Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa
Professor Auxiliar
ORIENTADOR
Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático