Dissertação
Optimization of a flow cytometric assay to measure antimalarial drug effects EVALUATED
A malaria é uma das doenças parasitárias mais importantes. A emergência de parasitas resistentes à maioria dos antimaláricos, nomeadamente à artemisinina, fármaco de primeira linha de tratamento, tem sido considerado um grave problema de saúde pública. Consequentemente, a monitorização da suscetibilidade do parasita tornou-se uma prioridade, existindo atualmente, diversos métodos para avaliar a sensibilidade do P. falciparum in vitro. No entanto, não existe nenhum considerado ideal devido às limitações inerentes a cada método. Além disso, nenhum deles consegue detetar a resistência à artemisinina. Foi então desenvolvido um novo teste baseado na deteção da hemozoina através de um citometro de fluxo modificado. Apesar das vantagens que apresenta por ser mais rápido e dispensar o uso de reagentes, existem algumas limitações. O objetivo deste projeto é otimizar o método testando diferentes condições da amostra. Os resultados obtidos sugerem que a lise das amostras diminui o limite de deteção para 0.05% e interessantemente, permite a deteção dos efeitos inibitórios dos fármacos entre as 10 e as 14 horas de incubação. Foi ainda testado um protocolo de sincronização rigorosa das culturas de forma a investigar a potencialidade do método para detetar a resistência a artemisinina. Além disso, modificou-se a concentração do fármaco e o seu período de incubação com a cultura. As taxas de sobrevivência calculadas logo após 30 horas permitiram distinguir os parasitas resistentes dos sensíveis. Estes resultados, embora preliminares, sugerem que este método pode ser uma alternativa promissora para testar in vitro a sensibilidade do P. falciparum a antimaláricos, incluído a artemisinina.
maio 11, 2017, 10:0
Publicação
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Orientação
ORIENTADOR
Instituto de Microbiologia & Instituto de Medicina Molecular, Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa
Professor Auxiliar
