Dissertação

Molecular mechanisms of planktonic cellular aggregation in Burkholderia multivorans EVALUATED

As bactérias podem proliferar como células livres ou em comunidade. Um exemplo destas comunidades são os biofilmes, os quais estão associados a uma superfície ou os agregados celulares planctónicos que se encontram livres. A formação de agregados celulares planctónicos é relevante em ambientes naturais, mas também durante a interação com células hospedeiras resultando muitas vezes em patogenicidade. É o caso de infeções respiratórias crónicas em doentes de fibrose quística (FQ), muitas vezes causadas por Pseudomonas aeruginosa em bactérias pertencentes ao complexo Burkholderia cepacia (Bcc) e que são capazes de formar tais agregados celulares. Embora se conheçam alguns mecanismos moleculares envolvidos na formação de agregados celulares planctónicos por certas bactérias, no complexo Bcc, estes permanecem desconhecidos. Por essa razão, usou-se um isolado clínico de Burkholderia multivorans proveniente de um doente com FQ para construir uma biblioteca de mutantes usando um transposão. Analisaram-se cerca de 900 mutantes, tendo 15 deles sido selecionados com base no seu fenótipo de agregação. Caracterizou-se cada um desses mutantes quanto à capacidade de formação de biofilme associados a superfícies, à motilidade, à produção de exopolissacáridos, à suscetibilidade a antibióticos, à taxa de crescimento em meio sintético e à virulência em Galleria mellonella. Considerando os resultados obtidos, foi impossível estabelecer uma relação linear entre cada fenótipo e a capacidade de agregação. Contudo, foi possível identificar prováveis intervenientes envolvidos na formação deste tipo de agregados, entre os quais estão genes envolvidos em sinalização, reguladores da transcrição, diversas proteínas membranares e proteínas envolvidas no metabolismo de lípidos.
Agregados celulares planctónicos, Fibrose quística, Burkholderia multivorans, Biblioteca de mutantes

dezembro 3, 2018, 9:0

Publicação

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Orientação

ORIENTADOR

Leonilde de Fátima Morais Moreira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar