Dissertação
Long-term survival and phenotypic variation of Burkholderia cepacia complex bacteria in saline solutions with or without benzalkonium and direct molecular detection of these bacteria EVALUATED
O complexo Burkholderia cepacia é um grupo de bactérias estreitamente relacionadas e implicadas na contaminação de produtos farmacêuticos. Devido a singular versatilidade metabólica e rápida adaptação a significativas alterações no ambiente, as bactérias do Bcc têm a capacidade de sobreviver e proliferar em sistemas de água usadas na indústria farmacêutica. Os produtos farmacêuticos contaminados com Bcc colocam sérios riscos aos pacientes com fibrose cística (FC) e imunodeprimidos, conduzindo a numerosos surtos de infeção registados mundialmente. Neste estudo, foram avaliadas as cinéticas de sobrevivência das estirpes B. cepacia e B. contaminans, em soluções salinas artificialmente contaminadas e expostas prolongadamente a carência nutricional e a benzalcónio, usado como conservante nos produtos farmacêuticos. Estas estirpes correspondem a dois conjuntos de clones, obtidas de soluções salinas para aplicação nasal e de doentes com FC. A persistência das bactérias nestas condições resultou numa variação fenotípica, destacando-se o aparecimento de variantes de colónias pequenas. O benzalcónio também foi associado a um importante estímulo da produção de maiores biofilmes e um aumento de turbidez e agregados durante incubação prolongada. O presente estudo também explorou o método semi-nested PCR para uma deteção direta destas bactérias em soluções salinas artificialmente contaminadas contendo ou não o benzalcónio. Os resultados obtidos indicam que esta abordagem apresenta limitações quando usada na deteção direta de um pequeno número de bactérias expostas prolongadamente a condições de stress, presumivelmente devido à sua maior resiliência à extração de DNA e à significativa percentagem de agregados e células não viáveis, especialmente em soluções salinas suplementadas com BZK.
novembro 7, 2018, 9:0
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Orientação
AUTOR
ORIENTADOR
Isabel Maria De Sá Correia Leite de Almeida
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático