Dissertação
Improved Acid-Fast Stain and Histology Method for the Detection of Mycobacteria in Tissue Samples EVALUATED
A tuberculose (TB) continua a ser uma das doenças com maior impacto a nível mundial com o maior número de mortes. Métodos de diagnóstico ineficiente, especialmente em países de maior incidência, são um dos principais problemas. A coloração ácido-resistente com auramina O (AuO) é um método aplicável em vários contextos, inclusive laboratórios com poucos recursos. Oferece um diagnóstico definitivo, sensibilidade relativamente alta, facilidade de utilização e custo reduzido. No entanto, não há investigação para a optimização do método para melhor deteção, segurança e redução do custo. Adicionalmente, o diagnóstico histológico da tuberculose não é eficaz; sendo as colorações ácido-resistentes o método de referência, é necessário identificar possíveis causas e soluções. Neste projecto, é demonstrado o potencial de redução do tempo e concentração do primeiro passo da coloração AuO. Também se verificou que será possível remover o fenol da solução, utilizando um passo de aquecimento a 52ºC para permeabilização. O efeito negativo do xilol para desparafinação na deteção de mycobacteria foi confirmado e vários métodos alternativos foram criados e testados. Um novo método baseado na projeção de ar quente na amostra (PHAD) foi desenvolvido, originando resultados consistentemente superiores ao método tradicional. Numa instância, os bacilos tinham uma fluorescência 142% mais intensa em média. Estes resultados mostram o potencial de optimização e adaptação destas metodologias para melhorar o diagnóstico da tuberculose.
novembro 22, 2019, 10:0
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