Dissertação
Optimization of Mesenchymal Stromal Cell Culture Methodologies Towards the Development of a Cell Therapy for Autoimmune Diseases EVALUATED
A otimização da produção em larga escala de células mesenquimais estromais (MSC) para o desenvolvimento de produtos de terapia celular é uma área que tem despertado crescente interesse. Neste trabalho foi investigada a criopreservação de MSC em diferentes meios. A viabilidade pós-descongelamento das células criopreservadas em Cryostor CS5 foi de 86,1±1,3%, o que é superior à viabilidade obtida para criopreservação em meio de cultura com 10% DMSO, considerado o standard. A caracterização do imunofenótipo das células após descongelação revelou a ausência de alterações significativas em relação ao esperado. Soluções de transporte foram também avaliadas enquanto alternativa à criopreservação. 2-8 Cellsius revelou-se eficaz na manutenção da viabilidade celular acima dos 70% durante 5-7 dias. Comparativamente, meio de cultura durou 3-4 dias e o uso de meio condicionado não se revelou vantajoso. Encapsulamento em alginato foi eficaz na manutenção de células à temperatura ambiente durante 11 dias, sendo a viabilidade celular após encapsulamento 80,3±1,3%. Depois do encapsulamento, as células suportaram a expansão de células hematopoiéticas. Todas as soluções de transporte permitiram que as MSC conservassem o imunofenótipo, a aderência e o potencial de diferenciação em várias linhagens, durante todo o ensaio. Uma análise dos custos de produção de MSC revelou que o número de passos de criopreservação e de passagens celulares entre eles influencia o custo por dose de uma terapia celular. O impacto destas soluções na qualidade e funcionalidade das MSC apresentado neste trabalho irá contribuir para a mais rápida aplicação do seu potencial terapêutico na clínica.
janeiro 21, 2021, 14:0
Publicação
Obra sujeita a Direitos de Autor
Orientação
ORIENTADOR
Ana Margarida Pires Fernandes Platzgummer
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar Convidado
