Bead – Based microfluidic system for RNA/DNA detection EVALUATED

Detalhes: MicroRNAs (miRNAs) em circulação têm sido estudados como uma nova geração de biomarcardores para doenças cardiovasculares e que podem, potencialmente, ser usados para diagnóstico e prognóstico de doenças cardíacas. O desenvolvimento de um sistema microfluídico baseado em esferas porosas, que possa detectar miRNAS, apresenta um grande potencial para desenvolver um sistema de baixo-custo, rápido, sensível e portátil. Nesta tese, foi estudado um sistema microfluídico que usa como plataforma de imobilização esferas de agarose para a detecção de DNA/RNA e com possível aplicação aos miRNAs. Os canais foram fabricados em PDMS e selados contra uma membrana de PDMS. Várias plataformas de imobilização foram testadas. Sondas de DNA foram imobilizadas na superfície das esferas de agarose e a intensidade de fluorescência foi medida para as diferentes plataformas. Provou-se que, com o uso das esferas, o sinal de imobilização aumenta 200 vezes em relação à imobilização feita num canal simples. O protocolo foi optimizado, tendo-se alterado fluxos de imobilização, dimensões do canal a usar e escolhido o melhor método de bloqueio. Utilizou-se ainda como método de deteção quimioluminescência e colorimetria sendo que o limite de deteção encontrado foi de 10pM e 100pM, respectivamente. Testou-se ainda a aplicabilidade do sistema ao uso de matrizes biológicas (soro humano e soro fetal de vitela) verificando-se que foi possível a detecção de sinal.

Discussão: novembro 25, 2015, 9:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

AUTOR

Catarina Raquel Fernandes Caneira (ist167316)

ORIENTADOR

Francisco Javier Enguita

Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa

Professor Associado

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático