Dissertação

Plasmon Coupled Fluorescence in Gold Nanorods Enhanced Optical Detection of Oligonucleotides EVALUATED

As extremidades dos nanobastonetes de ouro (AuNRs) são regiões hotspot com notável amplificação de campo próximo a partir de irradiação eletromagnética incidente, capazes de aumentar a emissão de fluoróforos na vizinhança. Os faróis moleculares são sequências de oligonucleótidos que emitem fluorescência quando ocorre hibridação com a sequência alvo. O alcance de detecção destas sondas é restrito pela intensidade do sinal fluorescente "ON" em relação ao estado "OFF". Portanto, a conjugação de AuNRs com faróis moleculares posicionados selectivamente é uma estratégia promissora para o desenvolvimento de um sensor nanohíbrido para detecção óptica intensificada de oligonucleótidos. Este trabalho está integrado na pesquisa em curso para o desenvolvimento do referido sensor e contribui através da caracterização da emissão dos faróis moleculares e dos nanohíbridos AuNRs-ADN. Primeiro, os efeitos de intensificação de fluorescência em AuNRs (25 x 71 nm) funcionalizados com um espaçador de ADN (10-pbs em cadeia dupla) marcado com ATTO647N foram caracterizados a nível de partícula única através de microscopia confocal de fluorescência. Este estudo estabeleceu que AuNRs funcionalizados indiscriminadamente precisavam de 10 vezes mais fluoróforo para atingir emissão ao nível dos AuNRs funcionalizados nas extremidades. Seguidamente, faróis moleculares contendo os supressores orgânicos DDQII e QSY21 foram estudados na ausência de AuNRs, em relação ao seu rendimento quântico e tempo de vida da fluorescência por espectroscopia convencional. Os faróis moleculares mostraram aumento não significativo do rendimento quântico na presença da sequência alvo, levando à sua exclusão (nas condições estudadas) como detectores adequados ao reconhecimento de oligonucleótidos para os nanobiosensores AuNRs-ADN em desenvolvimento.
fluorescência intensificada por plasmão, nanopartículas metálicas, espectroscopia de partícula única, microscopia de fluorescência

Novembro 28, 2019, 14:30

Publicação

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Orientação

ORIENTADOR

Pedro Miguel Neves Ribeiro Paulo

Departamento de Engenharia Química (DEQ)

Colaborador Docente