Dissertação

Engineering of smart exosomes for clearance of Abeta amyloid protein in Alzheimer’s disease EVALUATED

Atualmente, a Doença de Alzheimer (DA) é o principal tipo de demência, mundialmente. Apesar de os mecanismos subjacentes à sua patogénese ainda não serem totalmente conhecidos, o conhecimento atual suporta a ideia de um papel central do péptido A na mediação da patogénese da doença. Contudo, e apesar da gravidade da doença, os tratamentos existentes não conseguem prevenir ou adiar a sua progressão, sendo necessárias novas abordagens para enfrentar a problemática da agregação de A. A introdução de enzimas exogéneas com atividade proteolítica contra A representa uma alternativa possível. Porém, devido à falta de especificidade contra A, estas estratégias não são utilizadas. Assim, alcançar estratégias de modificação para exossomas, vesículas com capacidade de atravessar a barreira hematoencefálica, para permitir a entregar de Neprilisina (NEP) de maneira específica ao cérebro apresenta-se como uma abordagem terapêutica atraente e inovadora. Aqui, caracterizou-se as propriedades funcionais e estruturais de exossomas carregados com NEP, que posteriormente serão usados para o desenvolvimento de específicos veículos para a entrega de enzima. Utilizando uma metodologia baseada em precipitação, isolou-se com sucesso vesículas extracelulares (VEs) de células HEK293T com tamanhos iguais não só a exossomas, mas também a outros tipos de vesículas. Recorrendo a técnicas de espectroscopia, confirmou-se a presença de NEP nas amostras de VEs isolados de células que foram previamente transfectadas com a enzima. A atividade dessas vesículas contra A 1-42 foi analisada usando A 1-42 marcado e não marcado. A fibrilação de A 1-42 foi significativamente inibida pelas vesículas.
Doença de Alzheimer, proteína beta amiloide, exossomas, Neprilisina, vesiculas extracelulares.

Novembro 27, 2019, 11:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Fábio Monteiro Fernandes

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar Convidado

ORIENTADOR

Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar