Dissertação

The use of MSC derived hepatocyte-like cells (HLCs) in microfluidic culture systems: an approach for studying the metabolic syndrome EVALUATED

A síndrome metabólica afeta cerca de um quarto da população mundial. Três tipos celulares estão envolvidos no desenvolvimento desta doença, nomeadamente, adipócitos, miofibroblastos e hepatócitos. Assim, é crucial entender o papel da interação entre estes tipos celulares neste contexto. A utilização de dispositivos de microfluídica apresenta diversas vantagens, incluindo a possibilidade de estudar a comunicação entre vários tipos de células. Neste sentido, este trabalho focou-se na adaptação de células tipo-hepatócito (HLCs), derivadas de células estaminais mesenquimais da matriz do cordão umbilical (hnMSCs), a estes dispositivos e na avaliação do metabolismo energético destas células. Neste trabalho, conseguimos adaptar o processo de diferenciação hepático ao dispositivo de microfluídica e manter HLCs funcionais até duas semanas. Verificou-se ainda a manutenção das suas atividades de biotransformação de fase I e de fase II, capacidade de armazenamento de glicogénio, presença de marcadores hepáticos (CK-18, ALB, HNF-4α, OATP-C e MRP-2) e produção de ureia e albumina, ao longo deste período. Além disto, as HLCs apresentaram níveis de expressão de genes envolvidos na glicólise/lipogénese (PDK4), gluconeogénese (PEPCK e G6PASE), metabolismo de ácidos gordos (PPARA) e de ácidos biliares (FXR e CYP7A1) e biogénese mitocondrial (PGC-1A) com tendência semelhante à observada a nível fisiológico, em resposta à insulina e ao glucagon. Concluindo, foi possível adaptar e manter HLCs funcionais num dispositivo de microfluídica, mantendo as suas características ao longo do tempo em paralelo com a capacidade de resposta a estímulos hormonais. Deste modo, é possível futuramente utilizar estas células em estudos de interação celular nestes dispositivos de microfluídica.
Células tipo-hepatócito, Dispositivo de microfluídica, Insulina, Glucagon, Síndrome metabólico

Novembro 30, 2016, 10:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Joana Paiva Gomes Miranda

Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa

Professor Auxiliar Convidado

ORIENTADOR

Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar