Dissertação

Purification of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cells for Regenerative Medicine Applications EVALUATED

As Células Estaminais Pluripotentes humanas induzidas (hiPSC) têm enormes aplicações em Medicina Regenerativa, na descoberta de medicamentos e na modelação de doenças. As doenças neurológicas, em particular, poderão beneficiar da obtenção de Precursores Neurais (células com uma capacidade ilimitada de auto-renovação e de diferenciação em todos os subtipos neurais) a partir de hiPSC. No entanto, a incapacidade de gerar populações de Precursores altamente puras, sem hiPSC, após os protocolos de diferenciação neural impõe um obstáculo a estas duas últimas aplicações, por requerirem que o tecido adulto seja reproduzido com exactidão, bem como à sua utilização clínica, já que uma única hiPSC é capaz formar um teratoma. Contra este obstáculo, quatro tecnologias de separação celular foram avaliadas na sua capacidade de purificar as misturas obtidas após comprometimento neural: 1) Separação baseada em adesão, cuja resolução se revelou insuficiente 2) Eliminação Química, capaz de eliminar hiPSC desde que na ausência de outras células; 3) Separação Celular Magnética (com duas colunas), com eficiências médias de separação de cerca de 83% (células Tra-1-60+) e (96% colónias Oct4+ replaqueadas); 4) Cromatografia de Afinidade com criogéis de Poli-(vinil-alcoól) – cuja penetração celular foi caracterizada em termos de volume de injecção, fluxo, número e diâmetro celular; e relacionada com as propriedades microestruturais do criogel obtidas por microscopia confocal, criando as bases para as próximas etapas deste trabalho, ainda em desenvolvimento. Apesar de nenhuma das técnicas ter atingido os graus de pureza desejados, os dados e conhecimento recolhidos constituem um bom contributo para desenvolvimentos futuros.
Cromatografia por Afinidade, Células Plutipotentes Induzidas Humanas, Células Precursoras Neurais, Separação Celular Magnética por Afinidade, Purificação de Células Estaminais, Criogel supermacroporoso

Dezembro 10, 2013, 10:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Joaquim Manuel Sampaio Cabral

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Equip.Prof.Auxiliar Convidado