Dissertação

Microfluidic device application in biomedical research: local and spatial microenvironment control EVALUATED

A doença de Parkinson consiste numa desordem neurodegenerativa progressiva caracterizada pela morte dos neurónios dopaminérgicos da substancia nigra. O papel da alfa-sinucleína secretada por estes neurónios, quando ainda viáveis, na activação directa da microglia e na progressão da doença de Parkinson não foi ainda estudado em pormenor. Este trabalho envolveu a fabricação de um sistema microfluidico com características que permitiram inserir e manter células neuronais (SH-SY5Y) e microgliais (N9) em microcâmaras separadas e monitorizar o seu estado em tempo real. No futuro este dispositivo será capaz de controlar a comunicação molecular entre as duas populações celulares. Todo a estrutura microfluidica foi fabricada numa sala limpa classe 100 e consistiu no desenho e produção de uma mascara física através de técnicas de fotolitografia, na fabricação de um molde de SU-8 e na respectiva replicação em poli(dimetilssiloxano) posteriormente selada com um substrato de vidro. A estrutura final foi coberta com fibronectina para melhorar a adesão celular. Características relevantes do dispositivo, tais como: (i) o perfil de velocidade dos fluidos; (ii) a tensão hidrodinâmica; e (iii) o percurso das células, foram simuladas no COMSOL e verificadas experimentalmente. As condições de fluxo foram optimizadas de modo a evitar a depleção de nutrientes do meio de cultura e a danificação celular. Esta abordagem permitiu seguir o comportamento de duas populações de células distintas em tempo real e num microambiente químico e físico controlado com precisão.
Microfluidos, Cultura de células, Microambiente celular, SH-SYS5 neuroglioma, N9 microglia.

Maio 23, 2011, 17:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Tiago Fleming Outeiro

Instituto de Medicina Molecular - Faculdade de Medicina da Universidade de LIsboa

Professor Catedratico

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Catedratico