Dissertação

Development of Notch Signaling Biomaterials as a tool to control stem cell behavior EVALUATED

A via de sinalização Notch é fundamental na regulação do comportamento celular. Este trabalho propõe a criação de biomateriais poliméricos, funcionalizados com ligandos da via Notch de forma a activar esta cascata de sinalização, com vista a possíveis aplicações clínicas. Sintetizaram-se discos de poly(2-hydroxyethyl methacrylate) (pHEMA), que foram activados por N,N'-carbonyldiimidazole (CDI) a diferentes concentrações (0; 0.03; 0.3; 3 and 30 mg/mL) e funcionalizados com o fragmento F(ab?)2 de uma imunoglobulina humana (Ab). As superfícies foram caracterizada por FTIR-ATR, XPS, e a presença de Ab e Delta-1 foi confirmada por FTIR-ATR, XPS e ELISA, com este último ilustrando a orientação do ligando. A morfologia dos substratos foi ainda analisada por SEM, demonstrando uma superfície lisa que permanecera inalterada após a imobilização do Ab. A biofuncionalidade do Delta-1-pHEMA foi analisada através de uma linha celular de leucemia linfoblástica aguda de células T (T-ALL) codificando o gene repórter da proteína EGFP (TALL-1-rbs-EGFP). Os presentes materiais demonstraram ser capazes de activar a via Notch, tendo-se obtido os níveis mais elevados de activação para as superfícies activadas com 0.3 mg/ml de CDI. Em suma, os presentes resultados ilustram uma nova abordagem nos biomateriais para controlar a via Notch. Pela primeira vez, um polímero biocompatível com diferentes densidades de ligando imobilizado mostraram induzir níveis distintos de activação desta via de sinalização. Mais que uma ferramenta adequada para o estudo desta via, as presentes descobertas podem representar uma interface inovadora para controlar o Notch em diferentes sistemas celulares, com um papel iminente na expansão de HSC.
Notch, Biomateriais, pHEMA, Delta-1, Hematopoiese, Funcionalização de superfícies

Novembro 22, 2010, 9:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Raquel Madeira Gonçalves

Instituto de Engenharia Biomédica (INEB)

Investigador Auxiliar

ORIENTADOR

Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar