Dissertação
Studying cancer cell migration under confinement and with correlative microscopy EVALUATED
Vários fenómenos clinicamente relevantes implicam a migração de células cancerígenas, tal como a metastização de tumores. Por isso, é particularmente importante estudar a migração destas células em ambientes tri-dimensionais fisiologicamente pertinentes. Neste trabalho, a migração de células de cancro da mama MDA-MB-231 através de constrições físicas foi estudada, através do uso de dispositivos de polidimetilsiloxano (PDMS) contendo microconstrições de larguras 2, 3 e 5 µm. Tendo em conta que as proteínas Eps8L2 e Ctdnep1 estão envolvidas em migração celular bi-dimensional, investigou-se o papel destas proteínas em migração tri-dimensional. A duração de três períodos de transmigração – enter, cross e exit – foi calculada. Foi observado que a migração celular através de constrições implica a deformação nuclear, especialmente para constrições mais estreitas. Constrições de tamanhos diferentes não mostraram afetar a dinâmica de migração nuclear. Notavelmente, o período exit foi, em média, mais curto do que o período enter para constrições mais estreitas. Não foi possível avaliar o papel das proteínas Eps8L2 e Ctnep1 na migração celular tri-dimensional devido a dados insuficientes. Foi também implementado um procedimento de microscopia correlativa para o estudo de dinâmica celular, usando imagens de contraste de fase para células vivas seguida de imagens de fluorescência e super-resolution radial fluctuations (SRRF) para células fixadas. Particularmente, o sistema NanoJ-Fluidics foi utilizado para executar automaticamente a coloração de fibroblastos NIH 3T3. Com este procedimento, foi possível correlacionar dinâmica celular com informação estrutural subjacente. As estratégias apresentadas neste trabalho podem abrir o caminho para mais estudos sobre migração de células cancerígenas.
novembro 26, 2021, 15:0
Publicação
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Orientação
ORIENTADOR
Instituto de Medicina Molecular João Lobo Antunes / Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa
Professor Associado