Dissertação

Microfluidic cell-chip for an in vitro hepatic disease model EVALUATED

Sabe-se que os hepatócitos e as células de Kupffer (KCs) estão envolvidas na resistência à insulina (IR). Contudo, é necessário investigar o efeito das KCs no fenótipo patológico dos hepatócitos, com vista a conceção de novas terapias. Para isso, é necessário desenvolver modelos hepáticos in vitro fidedignos. Dispositivos de microfluídica têm um enorme potencial para produzir esse modelos, proporcionado uma melhor mimetização do ambiente hepático. Nesta tese, um dispositivo microfluídico para estudar as interações entre hepatócitos e KCs foi desenhado e fabricado. Como o dispositivo é complexo, aqui apenas focámos na adaptação e caracterização dos hepatócitos no mesmo. Células tipo-hepatócitos (HLCs) derivadas de células estaminais demostraram ser uma alternativa promissora para o desenvolvimento de modelos hepáticos, por isso, foram escolhidas para este trabalho. Um dispositivo de duas camadas foi fabricado com sucesso. De modo a adaptar completamente as HLCs ao dispositivo foram realizadas otimizações. As HLCs foram mantidas por mais do que uma semana dentro do dipositivo, tendo apresentado uma morfologia poligonal típica durante todo o tempo em cultura. Para demostrar que o chip pode providenciar a criação de modelos hepáticos off-the-shelf, a adaptação de HLCs congeladas no chip foi também avaliada. Tanto HLCs frescas como congeladas cultivadas no dispositivo demostraram maior produção de ureia comparativamente com as HLCs cultivadas em placas, provando o potencial das culturas em microescala. Concluindo, o trabalho aqui realizado constitui o primeiro passo para o desenvolvimento de um modelo hepático que integra hepatócitos e KCs para ser usado em estudos de modelação de doenças.
Dispositivo de microfluídica, Fígado, Células tipo-hepatócito.

novembro 26, 2021, 10:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Joana Paiva Gomes Miranda

Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa

Professor Auxiliar