Dissertação

Cloning of the Stromal Cell-Derived Factor 1 (SDF1) Gene into Plasmid Vectors for Minicircle Generation and Protein Expression CONFIRMED

As doenças cardiovasculares podem ser potencialmente tratadas por transplante de células estaminais mesenquimais geneticamente modificadas. Por exemplo, a sobre-expressão do factor derivado de células do estroma (SDF1), uma proteína que tem um papel significativo no retorno de células-tronco e na reparação de tecidos após uma lesão, é esperada para melhorar os efeitos terapêuticos das células estaminais mesenquimais transplantadas. Esta tese está focada na clonagem do gene SDF1α em plasmídeos com o objetivo de gerar minicírculos para transfecção em células estaminais mesenquimais. Adicionalmente, foram também contruídos outros plasmídeos para produção e purificação de SDF1. A inserção contendo SDF1 foi concebida com diferentes funcionalidades, nomeadamente a produção da proteína com a cauda de histidina, permitindo a sua purificação, ou a criação de um plasmídeo parental pronto para acomodar qualquer transgene. Um plasmídeo parental foi construído com sucesso e transformado na estirpe de E. coli BW2P, que produziu minicírculos (aprox. 500 pb) que codificam SDF1α após indução da recombinação com L-arabinose.
doenças cardiovasculares, minicírculos, SDF1α

Junho 23, 2016, 11:0

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Orientação

ORIENTADOR

Duarte Miguel De França Teixeira dos Prazeres

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático